藥物動(dòng)力學(xué)方法學(xué)模板

1、111人血漿中氯唑沙宗濃度的測(cè)定方法人血漿中氯唑沙宗濃度的測(cè)定方法11.1儀器與色譜條件儀器與色譜條件11.1.1儀器TSQQuantumAccess三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀配備電噴霧離子源（ESI）源及Xcalibur2.0.7數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（美國(guó)ThermoScientific公司）；島津LC20AD液相泵島津CBM20A系統(tǒng)控制器島津CTO20A柱溫箱，SIL20AC自動(dòng)進(jìn)樣器(日本島津公司)；電子天平(型號(hào)BS124S，賽多利斯Sar

2、tious公司)；旋渦混合器（型號(hào)XW80C，上海醫(yī)大儀器廠）；高速離心機(jī)（型號(hào)16121，上海手術(shù)器械廠）；數(shù)控超聲清洗器（型號(hào)KQ2200DE，昆山市超聲儀器有限公司）；數(shù)顯恒溫水浴鍋（型號(hào)HH2，國(guó)華電器有限公司）。11.1.2質(zhì)譜條件質(zhì)譜條件用LCMSMS進(jìn)行測(cè)定，離子源為ESI源，負(fù)離子化方式檢測(cè)，噴霧電壓為2.8kV；加熱毛細(xì)管溫度為350℃；鞘氣（N2）壓力為40Arb；輔助氣（N2）壓力為15Arb；碰撞氣（Ar）壓力為

3、1.5mTr；碰撞誘導(dǎo)解離（CID）電壓分別為21eV（氯唑沙宗），23eV（瑞格列奈）。掃描方式為選擇性反應(yīng)監(jiān)測(cè)（SRM）用于定量分析的離子反應(yīng)分別為mz168.0→mz132.1（氯唑沙宗）和mz451.3→mz379.3（內(nèi)標(biāo)瑞格列奈）。11.1.3色譜條件色譜條件色譜柱：SHIMADZUShimpack:VPODS；5Columnsize:1502.0mm；SerialNO.9042015；柱溫：40℃；流動(dòng)相A為甲醇，流動(dòng)相B

4、為水相（含5mmolL醋酸銨）；梯度洗脫，梯度設(shè)定為：0～0.5min，B50%；0.5～1.0min，B10%；1.0～4.0min，B10%；4.0～4.5min，B50%；4.5～6.0min，B50%；流速：0.3mLmin1；進(jìn)樣量：5L。11.2藥品與試劑藥品與試劑11.2.1對(duì)照品對(duì)照品內(nèi)標(biāo)瑞格列奈對(duì)照品為Dr.Reddy’sLabatiesItd公司產(chǎn)品，批號(hào)：REWS0801；氯唑沙宗由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)

5、：10036420030111.2.2試驗(yàn)試劑試驗(yàn)試劑甲醇、乙腈為色譜純（美國(guó)Tedia公司）；醋酸銨為分析純(南京化學(xué)試劑一廠)。11.3方法學(xué)確證方法學(xué)確證11.3.1樣品處理與測(cè)定樣品處理與測(cè)定取人血漿樣品200L至Effendf管，加入內(nèi)標(biāo)瑞格列奈(10gml)50L，混勻后加入乙腈600L，渦旋振蕩1min，12000轉(zhuǎn)min離心10min，取上清液10L，加入990L甲醇進(jìn)行稀釋，渦旋振蕩30s混勻，取上清液5L進(jìn)樣，測(cè)定受

6、試者血漿中氯唑沙宗的濃度。11.3.2專屬性試驗(yàn)專屬性試驗(yàn)在本試驗(yàn)條件下，氯唑沙宗的保留時(shí)間約為3.6min，瑞格列奈的保留時(shí)間約為4.0min。通過(guò)對(duì)來(lái)自6個(gè)不同個(gè)體的空白血漿測(cè)定表明，血漿中的內(nèi)源性雜質(zhì)不干擾樣品測(cè)定，受試者的空白血漿、空白血漿添加氯唑沙宗和內(nèi)標(biāo)（瑞格列奈）標(biāo)準(zhǔn)品及受試者服用受試制劑后的血漿樣品的色譜圖見(jiàn)圖11至圖13。3圖12空白血漿加氯唑沙宗（1gml）和瑞格列奈LCMSMS測(cè)定試驗(yàn)圖譜（圖譜來(lái)源于日內(nèi)精密度研究