雞堆型艾美爾球蟲乳酸脫氫酶增強型核酸疫苗構建和免疫保護研究.pdf

1、ClassifiedIndex：Confidential(yes／no)：NoCode：10224NO1106355DissertationfortheMasterDegreeConstructionofImmune—enhancingDNAVaccineofEimeriaacervulinaLactateDehydrogenaseandItsImmuneProtectionCandidate：CongPeijunSupervisor：

2、ProfLiGuangxingDegreeCategory：MasterofAgricultureCollege：CollegeofVeterinaryMedicineFirstleveldiscipline：VeterinaryMedicineSecondleveldiscipline：BasicVeterinaryMedicineHarbinJuneChina2014東北農業(yè)大學農學碩士學位論文221堆型艾美爾球蟲LDH基因克隆、測

3、序及序列比對16222堆型艾美爾球蟲LDH基因的原核蛋白表達和純化20223LDH的多克隆抗體制備和生物活性檢測22224真核表達載體的構建24225PVAX—IL181inkerLDH真核表達載體的構建。25226重組質粒體外瞬時表達的檢測一27227重組質粒在雛雞體內免疫效果檢測29228重組質粒在對球蟲感染的保護效果3023數(shù)據(jù)處理323結果3331RT—PCR擴增EacervulinaLDH基因33311孢子化卵囊總RNA的提取

4、33312堆型艾美爾球蟲LDH基因的擴增33313重組克隆質粒pMDl8TLDH鑒定34314重組克隆質粒pMDl8TLDH的測序結果3432堆型艾美耳球蟲LDH基因的原核表達及純化。35321LDH基因的亞克隆35322原核表達質粒pET30aLDH的PCR鑒定35323重組質粒pET30aLDH序列測定及二級結構預測分析36324LDH基因原核蛋白表達及純化3733重組質粒PVAXLDH的構建和鑒定3934PVAXIL18LINKE

5、RLDH融合基因真核表達質粒的構建和鑒定39341PVAXIL181inker—LDH基因推測表達蛋白特性軟件預測結果39342重組質粒PVAXIL181inkerLDH的PCR鑒定和酶切鑒定40343重組質粒的測序鑒定4035重組質粒的體外表達41351重組質粒PVAXLDH體外瞬時表達41352重組質粒PVAXIL181inkerLDH體外瞬時表達4136雛雞外周血T、B淋巴細胞增殖功能動態(tài)變化42361雛雞外周血液T淋巴細胞增殖功