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文檔簡介
1、栽培梨(Pyrusspp.)普遍潛帶蘋果莖溝病毒(Applestemgroovingvirus,ASGV)、蘋果莖痘病毒(Applestempittingvirus,ASPV)和蘋果褪綠葉斑病毒(Applechloroticleafspotvirus,ACLSV),感染病毒的梨樹長勢變弱,導致果實品質和產量的降低。培育和栽培無病毒苗木是防治梨病毒病的重要方法。本研究中,通過變溫熱處理結合超低溫處理進行病毒脫除試驗,并探討利用梨離體植株嫩
2、枝嫁接技術進行無病毒苗木的繁殖,同時系統(tǒng)比較帶病毒與脫毒梨離體植株的生長特性。研究結果對于建立和完善我國梨的脫毒技術體系具有指導和應用意義。
1.對采自遼寧興城的4個梨品種(京白梨、蘋果梨、色爾克甫和庫爾勒香梨)休眠芽進行分化培養(yǎng),以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,設計正交實驗,對IBA、6-BA和NAA三種植物生長調節(jié)劑的濃度進行優(yōu)化,分別篩選對4個梨品種的最適分化培養(yǎng)基。結果表明,不同梨品種最適分化培養(yǎng)基組成有所不同。6-BA為分
3、化培養(yǎng)所必須,濃度在1mg/L-4mg/L之間,IBA對其中3個品種(京白梨、色爾克甫和庫爾勒香梨)的分化培養(yǎng)具有促進作用,但所需濃度較低,在0.2mg/L-0.4mg/L之間;而NAA只對1個梨品種(京白梨)的分化培養(yǎng)具有促進作用。
2.以分化培養(yǎng)所獲得的帶有ASPV的“庫爾勒香梨”離體植株為材料進行變溫熱處理結合超低溫處理脫毒試驗,變溫熱處理時間分為20d、30d和40d三個時間段。同時,對試驗中不同處理的莖尖進行石蠟切片
4、,分析莖尖細胞顯微結構。以帶有ASGV的“金水2號”離體植株為材料進行化學(病毒醚25μg/mL)處理結合超低溫處理脫毒試驗,病毒醚處理時間為20d、30d和40d三個時間段。試驗結果顯示,變溫熱處理有利于“庫爾勒香梨”的生長與增殖,并能在一定程度上脫除庫爾勒香梨所帶ASPV(14%-87%),而凡是經過超低溫處理的莖尖在恢復培養(yǎng)過程中出現玻璃化現象,未能獲得成活的脫毒植株。經過切片觀察發(fā)現,經過變溫熱處理梨莖尖細胞在一定程度上增大,且
5、經過變溫熱處理過的莖尖再進行超低溫處理相比單一超低溫處理的莖尖,其莖尖細胞組織的破壞更加嚴重?;瘜W處理結合超低溫處理脫毒試驗中,變溫熱處理40d能完全脫除“金水2號”所帶ASGV,脫毒效率高于30d(50%)和20d(50%)。而超低溫處理對該病毒沒有顯示出脫除效果(0%)。同時發(fā)現,切取1mm莖尖的成活率與原始植株的健壯程度有關。
3.以“圓黃”和“雪花梨”兩個梨品種幼齡帶毒和脫毒離體植株為材料,分別測定其SOD活性、丙二醛
6、含量、可溶性蛋白含量和葉綠素含量等4項生理生化指標。試驗結果表明,幼齡帶毒和脫毒離體植株SOD活性、丙二醛含量和葉綠素含量三項指標無明顯差別,可溶性蛋白含量不同品種呈現相反的結果。從以上結果推測可能病毒在梨離體植株幼齡階段的影響較弱。
4.以沙梨品種“豐水”、“金水2號”和西洋梨品種“紅貝蕾莎”、“康弗侖斯”為試驗材料,嘗試采用離體植株嫩枝嫁接技術進行苗木繁殖。試驗結果表明“豐水”嫁接成活率最高,達到80%,“金水2號”和“紅
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