大白菜種子純度電泳檢測技術研究.pdf

1、山東農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文大白菜種子純度電泳檢測技術研究姓名：吳承來申請學位級別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導教師：張春慶2002.6.12昊承來：大白菜種子純度電泳檢測技術研究1前言11種子純度鑒定技術種子純度是種子質(zhì)量評價的重要指標。隨著種子問題的不斷增多，也促使種子純度鑒定技術的不斷發(fā)展。形態(tài)特征是鑒定品種純度的基本依據(jù)(劉思衡，1997)。包括種子形態(tài)鑒定和植株形態(tài)鑒定。種子形態(tài)鑒定是根據(jù)種子的形態(tài)特征如粒型、粒色及其深淺、胚的大小

2、、臍色、臍形等逐粒觀察，區(qū)分本品種、異品種(張春慶，1995)。這要求檢驗員對種子性狀十分熟悉。袁淑榮等(1997)報道，根據(jù)玉米花粉直感現(xiàn)象進行玉米雜交粒和母本自交粒的區(qū)分，其結果與田間鑒定結果問誤差約為120。蘇晨光州應用花粉直感現(xiàn)象鑒定黃早四作父本的雜交種純度。種植鑒定是正確評價種子真實性和品種純度的可靠方法，可作為種子貿(mào)易中的仲裁檢驗(張春慶，1995)，是目前種子純度鑒定中的重要方法。傳統(tǒng)的大田形態(tài)鑒定方法(顏啟傳，1984、

3、1987)，以幼苗、成年植株、葉(李名旺等，2001)、花(Gavrish，1992)、果等組織器官的顏色、形態(tài)等農(nóng)藝性狀作為鑒定的觀測指標。然而種植鑒定周期長，花費大，不僅受季節(jié)限制，而且很多性狀的表現(xiàn)常常受栽培措施及環(huán)境因子的影響；鑒定者觀察經(jīng)驗也制約著鑒定的準確性(文方德等，1995)。另外，大量新品種的不斷涌現(xiàn)，又增加了形態(tài)鑒定的難度。種子純度的物理、化學及生理等實驗室鑒定方法(顏啟傳，1984；李名旺等，2001)大大縮短了鑒

4、定時間，提高了鑒定效率。如燕麥熒光測定法和小麥苯酚染色法(Sinshetc，1991)，它們常要求被鑒定的種子含有某些特殊的生理活性物質(zhì)或對某些化學試劑有特殊的生理、生化或化學反應，故應用范圍受到極大限制。迅速發(fā)展的生化技術不斷應用于種子純度鑒定，包括蛋白質(zhì)(張春慶，1995；劉思衡，1997)和同工酶電泳，色譜法、毛細管電泳及免疫反應等餌urbridgeere，1986；Davidere，1992)。生化鑒定法準確性高，在分子水平上對

5、不同遺傳特性的種子給予辨別，不受外界條件的影響(陸士偉等，1987)。因此，成為種子純度鑒定主要方法，其中電泳技術得到了日益廣泛的應用，在種子純度鑒定中顯示強大生命力。利用免疫化學區(qū)分不同的品種首先在大麥上獲得了成功。1985年，Deichl和Donhauser用定量免疫電泳技術和鑒定了釀造大麥的不同品種(Dichletc，1985)、Burbidge(1986)等。從谷類貯藏蛋白單克隆抗體文庫中篩選出了一個特異性極強的抗體21／23，

6、區(qū)分了飼用大麥Cape和釀造大麥Clipper，并且建立了一種能快速、大量檢驗大麥品種的新方法一斑點酶聯(lián)免疫法。而Brinke(1989)等利用玉米自交系的特征醇溶蛋白制備單克隆抗體對不同自交系進行檢測，結果存在較強的交叉反應。高壓液相色譜技術是八十年代發(fā)展起來的種子純度鑒定新技術，具有精確度高，操作簡單等優(yōu)點(晏月明等，1995)。但需要特殊的儀器設備，對試劑的要求較高，在推廣中也有一定難度。分子生物學實驗技術的發(fā)展使種子純度鑒定進入