甲乙煎影響H-,22-小鼠肝癌組織粘附分子E-cadherin、CD54表達的實驗研究.pdf

1、目的：原發(fā)性肝癌是世界范圍內發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一，每年約有100萬以上的人新患此病。在我國，原發(fā)性肝癌也是常見惡性腫瘤之一，死亡率高，被稱為“癌中之王”。侵襲轉移是肝癌等惡性腫瘤的本質特征，也是導致患者死亡的主要原因。肝癌惡性程度高，早期即發(fā)生肝內播散轉移，因此在原發(fā)性肝癌的治療中，積極防治肝癌的侵襲轉移是非常重要的。中醫(yī)藥抗肝癌轉移有其獨特的優(yōu)勢。劉亞嫻教授根據中醫(yī)理論，參考古今醫(yī)家的經驗(如王旭高的有關論述、秦伯未《謙齋醫(yī)學講稿

2、》論肝病的內容等)，結合多年治療肝癌的臨床經驗，科學選藥組成了中藥復方甲乙煎。該方臨床應用中取得了滿意的療效，可改善患者生存質量，延長生存時間，防止肝癌進展、轉移、復發(fā)。肝癌轉移是一個極其復雜的多基因調控和多步驟發(fā)生過程，涉及癌細胞粘附、基質降解、細胞遷移等許多環(huán)節(jié)，細胞粘附是其中重要步驟之一。 本實驗的目的在于探討甲乙煎抗H22小鼠肝癌轉移的作用機理，重點探討甲乙煎對肝癌組織中細胞粘附分子E-cadherin和CD54表達的影

3、響，為該方防治肝癌轉移提供客觀而科學的依據，進一步指導和擴大臨床應用。 方法：取SPF級雄性BALB/C小鼠75只，體重18±2克，隨機分為5組：病理模型對照組(A)，西藥(5-Fu)對照組(B)，中藥復方甲乙煎小劑量組(C)、中劑量組(D)、大劑量組(E)，每組各15只。復制小鼠肝癌淋巴道轉移模型：復蘇肝癌H<,22>瘤株，注入BALB/C小鼠腹腔內，觀察腹圍增至最大時抽取腹水，經過處理后，注入第二代小鼠腹腔內，依次傳第三代，

4、抽取腹水，經過處理注入小鼠爪墊內側皮下。自造模第2天，開始灌胃，模型組予等量生理鹽水，日1次，連續(xù)20天。實驗結束后第2天，各組小鼠頸椎脫臼法處死，稱重，取脾、胸腺和原發(fā)瘤。計算脾指數、胸腺指數；通過HE染色，光鏡下觀察H<,22>小鼠肝癌細胞局部侵襲程度；并通過免疫組化法觀察局部瘤組織中細胞粘附分子E-cadherin和CD54的表達水平。數據采用方差分析、秩和檢驗。 結果：1 各組脾指數的比較：西藥5-Fu治療組的脾指數顯著

5、低于病理模型對照組及甲乙煎各劑量治療組，在統(tǒng)計學上有顯著性差異(P<0.01.)；模型對照組的脾指數高于甲乙煎小、中劑量組，但均無顯著性差異(P>0.05)，而低于甲乙煎大劑量組，且有顯著性差異(P<0.05)：甲乙煎大劑量組的脾指數高于小、中劑量組，有顯著性差異(p<0.01或.P<0.05)，中劑量組雖然高于小劑量組，但無顯著性差異(P>0.05)。2 各組胸腺指數的比較：模型對照組的胸腺指數均低于各治療組，與甲乙煎中、大劑量組有顯

6、著性差異(P<0.05)，而與甲乙煎小劑量組和5-Fu組無顯著性差異(P>0.05)：各治療組之間比較，均無顯著性差異(P>0.05)。3 各組局部瘤組織侵襲程度比較：模型對照組的瘤組織侵襲程度均高于各治療組，有顯著性差異(P<0.01)；而各治療組之間比較，均無顯著性差異(P>0.05)。4 各組局部瘤組織E-鈣粘蛋白表達的比較：模型對照組瘤組織E-鈣粘蛋白的表達均弱于各治療組，有顯著性差異(P<0.01或P<0.05)；而各治療組之

7、間比較，均無顯著性差異(p>0.05)。5 各組局部瘤組織CD54表達的比較：模型對照組瘤組織CD54的表達均強于各治療組，有顯著性差異(P<0．01或．P<0．05)；而各治療組之間比較均無顯著性差異(P>0．05)。 結論：1 甲乙煎可提高小鼠機體免疫能力，對免疫功能的調整，存在量效關系，對脾指數、胸腺指數的影響均以大劑量組最明顯。2 甲乙煎可降低H<,22>肝癌小鼠癌細胞在局部的侵襲程度，與劑量大小無關。3 甲乙煎可提高H