大鼠前庭毛細胞神經遞質受體分布及功能.pdf

1、第一部分 單細胞RT-PCR方法的建立及煙堿型乙酰膽堿受體α9亞基在大鼠單個Ⅱ型前庭毛細胞中的表達 目的：乙酰膽堿(Ach)是脊椎動物外周前庭系統(tǒng)最主要的傳出神經遞質，并且煙堿型乙酰膽堿受體α9亞基(nAChR)被認為是介導外周前庭系統(tǒng)中膽堿能傳出信號的主要受體之一。研究表明人類與其他哺乳類動物(包括大鼠)的乙酰膽堿能傳出神經纖維支配模式相近，而人類與鳥類之間乙酰膽堿能傳出神經纖維支配模式間有許多差別。因此以大鼠為研究對

2、象可以幫助了解人類單個前庭毛細胞的神經纖維支配模式及信號轉導方式，進而為前庭疾病的病理機制闡明及前庭疾病的治療提供理論基礎。本研究目的為建立單細胞RT-PCR方法及檢測α9nAChR在大鼠單個Ⅱ型前庭毛細胞中的表達。 方法：用RT-PCR方法檢測α9nAChR在大鼠前庭終器中的表達；建立單細胞RT-PCR方法并用單細胞RT-PCR方法檢測α9nAChR在大鼠單個Ⅱ型前庭毛細胞中的表達。 結論：此研究成功地建立了單細胞RT

3、-PCR方法，其可以有效地檢測在單個前庭毛細胞中某種mRNA特異性的表達。研究結果證實α9nAChR在大鼠單個Ⅱ型前庭毛細胞中有表達，并進一步表明α9nAChR是介導外周前庭系統(tǒng)中膽堿能傳出信號的主要受體之一。 第二部分 γ-氨基丁酸B型受體GB1亞基在大鼠前庭終器的表達 目的：檢測大鼠前庭終器中γ-氨基丁酸B型受體(GABAB受體)GB1亞基的表達，探討GABAB受體在大鼠前庭終器的分布。 方法：根據(jù)G

4、eneBank公布的大鼠GABAB受體GB1亞基的mRNA序列設計跨內含子的特異性引物，運用RT-PCR方法檢測大鼠前庭終器中編碼GABAB受體GB1亞基的mRNA的表達，對PCR產物測序確認。 結論：在大鼠前庭終器組織中有GABAB受體GB1亞基的表達。提示GABAB受體可能介導前庭外周系統(tǒng)GABA能信號的轉導。 第三部分 GABAB受體在大鼠單個Ⅰ型前庭毛細胞中的表達及功能 目的：GABA是大鼠外周前

5、庭系統(tǒng)的傳出神經遞質之一。通常認為哺乳類動物Ⅰ型前庭毛細胞(VHCsⅠ)為傳入神經盞完全包裹而沒有傳出神經末梢直接支配。但1991年Wackymetal.報道CGRP免疫陽性傳出神經末稍偶爾會穿過包繞大鼠VHCsⅠ的傳入神經盞與某些大鼠VHCsⅠ直接接觸。目前尚無關于GABA能傳出神經末稍是否直接支配大鼠VHCsⅠ的研究。本研究目的為探討GABAB受體在大鼠VHCsI中表達及其電生理特性，提出并證明GABA能傳出神經末稍可能直接支配某些