大鼠慢傳輸型便秘模型的建立及其發(fā)病機制的初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:慢傳輸型便秘(Slow transit constipation ,STC)是一種常見的以腸動力障礙為特征的臨床疾病,隨著人們生活水平的提高、工作節(jié)奏的加快,發(fā)病率逐年上升.由于臨床上難以對便秘患者進行前瞻性研究,因而對其病因及發(fā)病機制缺乏深入的認識,如何建立一種制作簡單、可重復性強、符合臨床特點的慢傳輸型便秘動物模型,對深入研究慢傳輸型便秘的病因、發(fā)病機制及轉歸具有重要意義.因此,該研究擬應用復方苯乙哌啶建立一種大鼠慢傳輸型便秘

2、模型,通過研究慢傳輸型便秘模型大鼠結腸肌電、結腸肌間神經叢內多種神經成分及腸神經系統內Cajal間質細胞(ICC)的變化,探討慢傳輸型便秘的發(fā)生機制.方法:健康Wistar大鼠74只,分2期進行實驗.第 1期42只,隨機分7組,每組6只,篩選藥物劑量;第2期32只,隨機分為對照組、模型組,每組16只,根據所選藥物劑量,建立大鼠慢傳輸型便秘模型.120天后,采用活性炭灌胃法測定腸道傳輸速度,同時進行結腸肌電檢測.然后處死大鼠,取近側 (距

3、盲腸約1cm)及遠側 (距肛門約2cm) 的結腸進行HE染色;對結腸肌間神經叢標本,采用組織化學染色法,顯示大鼠結腸肌間神經叢內AchE能神經和NOS能神經;采用免疫組織化學技術在鋪片上顯示大鼠結腸肌間神經叢內VIP能神經和SP能神經;碘化鋅-鋨酸(ZIO)染色顯示大鼠結腸神經系統內ICC的病理改變.結果:(1)模型組大鼠腸道傳輸速度與對照組相比明顯減慢,首粒黑便排出時間為356±50min,較對照組大鼠顯著延長(249±35min,p

4、﹤0.01).(2)模型組大鼠結腸慢波出現雙向改變,部分大鼠結腸慢波頻率明顯減慢(5.55±1.20次/min vs 對照組13.20±1.09次/min,p﹤0.01),振幅增加(0.43±0.05 mv vs 對照組0.19±0.02 mv,p﹤0.01),波形仍表現為不規(guī)則的近似正弦波樣曲線;部分大鼠結腸慢波頻率出現快速性改變(30.85±3.86次/min vs對照組13.20±1.09次/min,p﹤0.01),振幅強弱不等(

5、0.21±0.03 mv vs對照組0.19±0.02 mv,p﹤0.01),波形較不穩(wěn)定,且出現基線位移.(3)結腸切片HE染色發(fā)現模型組大鼠均顯示粘膜慢性炎癥改變.(4)結腸肌間神經叢鋪片組化染色發(fā)現模型大鼠結腸肌間神經叢內膽堿能神經分布較稀疏,數量較少,但胞體增大,染色加深(陽性細胞數14.34±4.56 vs 對照組27.56±6.64,p﹤0.01;核漿比例0.57±0.20 vs 對照組0.76±0.18,p﹤0.01);氮

6、能神經元分布較稀疏,數量較少,染色深淺不一,節(jié)間纖維較細小,染色較淡(陽性細胞數7.10±2.04 vs 對照組11.16±2.81,p﹤0.01;弱陽性細胞數2.21±1.38 vs對照組0.84±0.67,p﹤0.01).(5)免疫組化染色發(fā)現模型大鼠VIP陽性神經節(jié)及節(jié)間束細小,節(jié)內神經元數量明顯減少,神經束內神經纖維分布稀疏,陽性神經元胞體少見(平均面密度值19.35±1.13vs對照組23.08±1.82,p﹤0.01);SP

7、陽性神經節(jié)明顯增大,神經束增粗,神經元和神經纖維明顯增多,免疫反應性增強(平均面密度值18.14±1.18 vs對照組15.45±1.05,p﹤0.01).(6)ZIO染色顯示便秘大鼠結腸神經系統內ICC分布不均勻,有的視野ICC密集,突起連接雜亂,有的視野ICC稀少,突起不能相互連接形成網絡.結論:1.成功建立了大鼠慢傳輸型便秘模型,該模型簡單經濟,可重復性強.2.慢傳輸型便秘大鼠結腸肌間神經叢存在明顯的神經病理學改變,結腸傳輸功能障

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