仿刺參多糖的提取分離及初步結構分析.pdf

1、本文以仿刺參為原料進行了仿刺參多糖的提取、分離，并對仿刺身多糖中的糖胺聚糖進行了理化性質和結構分析。建立并優(yōu)化了柱前衍生高效毛細管電泳法測定海參多糖單糖組成的方法，該方法具有簡單、快速、分離效率高等特點，能同時測定海參多糖中氨基糖、中性糖及糖醛酸的組成，對于研究海參多糖的單糖組成有重要意義。仿刺參多糖提取采用木瓜蛋白酶水解、乙醇沉淀和醋酸鉀沉淀法；分子量及其分布的測定采用高效凝膠滲透色譜法；化學組成及其單糖組成分別采用傳統化學方法和柱前

2、衍生高效毛細管電泳法，并對兩種方法的結果進行了對比；利用陰離子交換柱層析和凝膠柱層析對仿刺參多糖不同組分進行了分離純化；仿刺參糖胺聚糖硫酸基的取代位置可以通過紅外色譜法、核磁共振波譜以及質譜法測定；糖胺聚糖的支鏈和主鏈結構可以通過部分酸水解，凝膠柱層析分離，色譜分析測定。
　　 本研究表明，通過溫和的酶水解法的到的仿刺參多糖得率為1.18‰(以鮮海參計算)。GPC法得到的分子量為5萬。仿刺參多糖總糖、蛋白質、硫酸基、糖醛酸及氨基

3、糖含量分別為51.54％、5.50％、25.07％、17.20％和13.53％。氣相色譜法測定其中性糖結果表明仿刺參多糖主要含有巖藻糖，含量為15.4％。柱前衍生高效毛細管色譜法采用4 mol/L，TFA，110℃，6h的水解條件，利用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生，于紫外245nm處檢測，進行毛細管電泳分析。實驗對10種不同海參多糖進行了單糖組成分析，建立了高效毛細管電泳法測定海參單糖組成的方法。仿刺參多糖的單糖組成為

4、GalN：Glc：Man：Fuc：Gal：GlcUA=3.23:0.83:0.38:3.97:0.68:1.00，其對糖醛酸和氨基糖的組成測定結果和化學法測定結果基本一致，但對中性糖的測定，GC方法測定結果偏低。紅外波譜結果表明，仿刺參多糖中含有羧基、羥基、乙酰氨基、硫酸基和巖藻糖，在848cm-1的吸收峰表明其硫酸基取代位置是巖藻糖的C-4位或者氨基半乳糖的C-4位。仿刺參多糖通過Q-FF陰離子交換樹脂洗脫，分別在鹽濃度為0 mol/