ER、PR及HER-2-neu在乳腺癌原發(fā)灶與腋窩淋巴結轉移灶中的對比分析.pdf

1、背景與目的：乳腺癌內分泌治療及分子靶向治療的基礎是雌激素受體(EstrogenReceptor，ER)、孕激素受體(ProgesteroneReceptor，PR)陽性表達以及人類表皮生長因子受體2（Epithelial growth factor receptor，HER-2/neu）基因擴增。目前臨床多數(shù)采用原發(fā)灶手術切除標本或粗針穿刺標本進行檢測以指導治療，忽略了原發(fā)灶與轉移灶間可能存在的異質性。本實驗對比分析進展期乳腺癌原發(fā)灶與

2、同期腋窩淋巴結轉移灶間ER、PR蛋白表達及HER-2/neu基因狀態(tài)，探討進展期乳腺癌ER、PR蛋白表達及HER-2/neu基因狀態(tài)的穩(wěn)定性，指導臨床檢測的標本選擇。
　　方法：篩選2008年1月到2012年7月在紹興市人民醫(yī)院接受乳腺癌改良根治術、同期腋窩淋巴結轉移數(shù)≥5個的女性進展期乳腺癌病例53例，術前均未進行任何治療。取存檔蠟塊原發(fā)灶5個位點及全部淋巴結轉移位點制備組織芯片，組織芯片直徑2mm、高3～4mm。采用徠卡Bon

3、d-Max全自動免疫組化儀對ER、PR蛋白進行染色，ER及PR一抗克隆號分別為SP1和SP2，購自福建邁新生物技術開發(fā)有限公司。雙探針熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization)法檢測HER-2/neu基因狀態(tài)，HER-2/neu DNA探針試劑盒購自北京金菩嘉醫(yī)療科技有限公司。每個位點中ER或PR的陽性細胞數(shù)≥10％視為陽性。FISH判讀時每個位點至少計數(shù)20個不重疊的癌細胞。HER-2/neu

4、基因信號的總數(shù)與17號染色體信號的總數(shù)比值＞2.2或眾多HER-2/neu基因信號連接成簇，視為擴增。比值＜1.8視為無擴增，比值介于1.8～2.2視為臨界值。同一病例所有位點ER蛋白表達或PR蛋白表達或HER-2/neu基因狀態(tài)都一致者，視為均質性病例，只要有不一致，則為異質性病例。
　　結果：制備19個芯片蠟塊，共867個位點，ER、PR、HER-2/neu的有效位點數(shù)分別為819，813，776。ER、PR的有效例數(shù)均為53

5、例，HER-2/neu有效例數(shù)為52例。ER、PR蛋白表達在乳腺癌所有位點呈均質性的病例分別占66.0％和67.9％，ER、PR蛋白在乳腺癌原發(fā)灶與轉移灶間的一致性差，一致性系數(shù)(k)值分別為0.324和0.156。說明ER、PR蛋白異質性顯著，穩(wěn)定性差。HER-2/neu基因在乳腺癌原發(fā)灶與轉移灶間顯示出極好的一致性，一致性系數(shù)(k)值為0.840。大部分(92.3％)病例HER-2/neu基因呈高度均質穩(wěn)定狀態(tài)，部分病例(7.7％)

6、呈異質性。ER均質性類型以及原發(fā)灶均質性而轉移灶異質性的類型具有統(tǒng)計學意義，PR均質性類型、HER-2/neu均質性類型都具有統(tǒng)計學意義。ER、PR蛋白表達均質性病例或HER-2/neu基因狀態(tài)均質性病例的發(fā)病年齡、腫瘤大小、淋巴結個數(shù)、腫瘤部位與異質性病例相比，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　結論：同期腋窩淋巴結轉移數(shù)≥5個的中國女性進展期乳腺癌，部分病例需在原發(fā)灶和轉移灶多點取樣才能全面反映ER、PR蛋白表達和HER-