漢防己甲素抑制PANC-1細胞增殖作用的機制探討.pdf

1、第一部分 漢防己甲素對PANC-1細胞增殖作用的影響
　　 目的:
　　 觀察漢防己甲素對人胰腺癌細胞株PANC-1細胞增殖的影響。
　　 方法:
　　 1.MTT法檢測PANC-1細胞對不同濃度漢防己甲素的藥物敏感性。
　　 2.流式細胞術檢測漢防己甲素對PANC-1細胞周期的影響。
　　 3.流式細胞術檢測漢防己甲素對PANC-1細胞凋亡的誘導作用。
　　 結果:
　　

2、 1.MTT結果顯示漢防己甲素對PANC-1細胞增殖抑制作用呈明顯的濃度和時間依賴性。不同濃度漢防己甲素作用PANC-1細胞24 h和72 h，IC50分別約為17 mmol/L和10 mmol/L。80 mmol/L 漢防己甲素處理72 h，PANC-1細胞的抑制率達到100％。
　　 2.PANC-1細胞經(jīng)漢防己甲素處理24 h后，流式細胞術檢測到明顯的細胞G1期阻滯(G1期細胞比例可增至68.19％)，而S期細胞比例則顯著

3、降低(可降至23.82％)。G2/M期細胞比例增加(可增至7.98％)。
　　 3.漢防己甲素處理PANC-1細胞24h，流式細胞術檢測到較明顯的細胞凋亡發(fā)生(凋亡率8.29％)。
　　 結論:
　　 1.漢防己甲素能有效抑制PANC-1細胞增殖，IC50在微摩爾水平。
　　 2.漢防己甲素能顯著引起PANC-1細胞G1期阻滯，并降低S期細胞比例。G2/M
　　 期細胞比例也有所增加。
　　

4、 3.漢防己甲素可誘導PANC-1細胞凋亡的發(fā)生。
　　 第二部分 己甲素抑制PANC-1細胞增殖作用的機制探討
　　 目的:
　　 探討漢防己甲素抑制PANC-1細胞增殖作用的可能分子機制。
　　 方法:
　　 1.實時定量PCR檢測PANC-1細胞經(jīng)漢防己甲素處理24-72 h后細胞周期相關基因P21cip/waf1、c-myc、Cdc25A、E2F1和凋亡相關基因survivin mRNA

5、水平變化。
　　 2.Western blot檢測經(jīng)漢防己甲素處理24-72 h后PANC-1細胞P21cip/waf1蛋白表達水平的改變。
　　 結果:
　　 1實時定量PCR結果顯示，PANC-1細胞經(jīng)漢防己甲素處理24 h，與對照組相比，P21cip/waf1 mRNA水平明顯增加，而Cdc25A、c-myc、E2F1、survivin mRNA 水平均下降。
　　 2.Western blot結果