

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、目的:血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)發(fā)現(xiàn)于1989年,是一種能特異的作用于血管內皮細胞的生長因子,具有促血管生成等活性。血管內皮細胞生長因子(VEGF)家族成員包括:VEGF-A、VEGF-B、胎盤生長因(PIGF)、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、VEGF-F和它們的受體VEGFR-1、2、3及Neuropilins,VEGF受體特異性地分布于血管內皮等細胞
2、,VEGF通過與其受體的結合而發(fā)揮促進血管新生和增強血管通透性的生理功能。在人類,VEGF-A占主導作用,其共有8種亞型,包括:VEGF121,VEGF145,VEGF148,VEGF165,VEGF165b,VEGF183,VEGF189和VEGF206,其中VEGF121和VEGF165是主要的分泌亞型。
一氧化氮(Nitric oxide,NO)廣泛分布于動物和植物的體內,具有多種的生理病理學功能,是作用最強的舒血管
3、物質之一。NO作為信號傳導因子與鳥苷酸環(huán)化酶結合,使之活化,cGMP含量升高,cGMP可降低血管平滑肌中的Ca2+的濃度,引起血管平滑肌舒張,血管擴張、血管通透新增加。
血管新生(Angiogenesis)及通透性增加在腫瘤、風濕性關節(jié)炎、心血管疾病、糖尿病并發(fā)癥等疾病發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用,而血管新生與VEGF有著密切的關系。近年研究發(fā)現(xiàn),在諸多皮膚病如特應性皮炎、銀屑病、尖銳濕疣等的皮損和血清中VEGF水平均高于正常
4、,所以認為其與這些皮膚病的發(fā)生發(fā)展密切相關,因此,研究血管內皮生長因子在皮膚病的表達及其在病理過程中所發(fā)揮的作用,不僅有助于闡明諸多皮膚病的發(fā)病機制,而且可通過對其作用靶點的研究,將為今后進一步探討其治療措施提供新的思路。
VEGF121和VEGFl65是皮膚組織主要的表達亞型,兩者參與各種病理生理過程,以往的各種研究主要著眼于VEGF-A的研究,具體到亞型的很少,所以,本研究旨在通過研究兩種不同亞型的VEGF對血管內皮細
5、胞通透性影響,以及不同亞型VEGF刺激血管內皮細胞后NO釋放量的測定,明確引起血管通透性增加的主要VEGF亞型,從而為研發(fā)VEGF阻斷劑,靶向治療存在VEGF異常表達的皮膚病提供可靠的理論依據(jù),同時可將毒副作用降到最低。
方法:
1、人類臍靜脈內皮細胞(HUVEC)的體外培養(yǎng)
EGM-2完全培養(yǎng)基37℃、5%CO2培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng),2-3天更換一次培養(yǎng)基。
2、雙腔通透性測定試劑盒(
6、In Vitro Vascular Permeability Assay kit;ECM640)建立通透性檢測模型,濃度為25ng/ml的VEGF121或VEGF165刺激人類臍靜脈內皮細胞。
3、熒光酶標儀(Exmission:490 nm,Emission:520nm)測定底層培養(yǎng)基中不同時間FITC-dextran量的變化。
4、人類臍靜脈內皮細胞的體外培養(yǎng),濃度為25ng/ml的VEGF121或VEG
7、F165刺激人類臍靜脈內皮細胞,Griess法測定不同時間培養(yǎng)基中NO含量。
5、制圖,運用統(tǒng)計學軟件SPSS13.0對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。
結果:
1、經(jīng)VEGF165或VEGF121刺激人類臍靜脈內皮細胞,通透性物質(FITC-dextran)測定
1.1熒光酶標儀測定不同刺激時相的通透性物質(FITC-dextran)的量,應用重復測量的方差分析,在不同刺激物之間培養(yǎng)基中F
8、ITC-dextran的量有明顯的差異,p<0.05,即經(jīng)VEGF121處理的血管內皮細胞,滲透到細胞層外的FITC-dextran顯著多于VEGF165和空白對照組。說明VEGF121對細胞通透性影響較VEGF165顯著。
1.2在不同刺激時相之間通透性物質有明顯的差異,p<0.05,即隨著刺激時間的增加,滲透到細胞層外的通透性物質(FITC-dextran)也明顯增加。
1.3刺激時間和不同刺激物之間存在
9、交互作用,p<0.05。
2、經(jīng)VEGF165或VEGF121刺激人類臍靜脈內皮細胞,培養(yǎng)基中NO產(chǎn)量的測定
2.1 Griess試劑盒測定培養(yǎng)基中NO含量,應用重復測量的方差分析,在不同刺激物之間NO產(chǎn)量有明顯的差異,p<0.05,即經(jīng)VEGF121處理的血管內皮細胞,分泌的NO顯著多于VEGF165和空白對照組。VEGF121對細胞NO產(chǎn)量的影響較VEGF165顯著。
2.2在不同刺激時相之
10、間分泌的NO的量有明顯的差異,p<0.05,即隨著刺激時間的增加,分泌的NO也明顯增加。
2.3刺激時間和不同刺激物之間存在交互作用,p<0.05。
結論:
VEGF121和VEGF165均能夠引起血管內皮細胞通透性增加,刺激內皮細胞產(chǎn)生NO。但是,VEGF121對通透性的影響遠高于VEGF165,VEGF121刺激血管內皮細胞所產(chǎn)生的NO含量高于VEGF165,VEGF121可能是導致血管通透
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- VEGF增加內皮細胞對脂蛋白通透性的機制研究.pdf
- VEGF對血管內皮細胞脂蛋白通透性的調控及藥物的抑制作用.pdf
- 間充質干細胞旁分泌VEGF-HGF對肺微血管內皮細胞通透性的作用及機制研究.pdf
- 剪切力與血管內皮細胞通透性的關系.pdf
- 血管內皮生長因子(VEGF)121和165亞型對體外培養(yǎng)的人類臍靜脈內皮細胞FAK及Akt信號通路影響的研究.pdf
- 大川芎丸對血管內皮細胞VEGF分泌水平的影響.pdf
- VEGF對低糖性腦微血管內皮細胞損傷的作用研究.pdf
- RTEF-1抗血管內皮細胞通透性增加的機制研究.pdf
- SDF-1和VEGF對BMSCs向血管內皮細胞分化影響的研究.pdf
- 耳蝸血管紋微血管內皮細胞通透性分子調控機理的初步研究.pdf
- VEGF-,165-轉染大鼠血管內皮細胞誘導移植胰島再血管化及對功能影響的實驗研究.pdf
- CSE對肺血管內皮細胞凋亡和VEGF-NEGFR2表達的影響.pdf
- VEGF shRNA表達質粒抑制血管內皮細胞VEGF表達及角膜新生血管的研究.pdf
- uPA和VEGF165單基因真核質粒共轉染人臍靜脈內皮細胞對細胞增殖的影響.pdf
- 大黃單體降低血管內皮細胞通透性及信號轉導機制.pdf
- 三株含有人FGF-2、VEGF165、VEGF121基因非復制型腺病毒的構建和鑒定.pdf
- 丁酸鈉抑制缺氧致血管內皮細胞通透性增加及其機制研究.pdf
- 人VEGF165基因轉染人外周血內皮祖細胞的實驗研究.pdf
- 內毒素誘導血管內皮細胞通透性增加及微管解聚的機制研究.pdf
- GM-CSF對誘導人血管內皮細胞血管形成的影響及VEGF的作用.pdf
評論
0/150
提交評論