乙腦患兒血漿和腦脊液中ET、CGRP含量變化及臨床意義.pdf

1、目的：流行性乙型腦炎(epidemicencephalitisB，encephalitisB)為乙腦病毒引起的以腦實(shí)質(zhì)炎癥為主要病變的急性傳染病。本病病死率可高達(dá)15％以上，存活者部分可留下后遺癥，目前尚無(wú)特異性治療藥物。因此，進(jìn)一步加強(qiáng)其發(fā)病機(jī)制的研究，對(duì)于早期防治本病及估計(jì)預(yù)后具有重要意義。內(nèi)皮素(endothelin，ET)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(centralnervoussystem，CNS)中主要由神經(jīng)組織產(chǎn)生，迄今是收縮血管最強(qiáng)的

2、生物肽；而降鈣素基因相關(guān)肽(calcitoningene-relatedpeptide，CGRP)是在人和動(dòng)物體內(nèi)存在的一種新型的內(nèi)源性生物活性多肽，廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，迄今被認(rèn)為是舒張血管最強(qiáng)的物質(zhì)。ET和CGRP均具有多種生物學(xué)活性，并參與許多疾病的病理生理過(guò)程。近年來(lái)，對(duì)ET、CGRP在中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用及影響的研究日益受到重視，但二者是否參與乙腦的病理生理過(guò)程尚不清楚。故本文通過(guò)檢測(cè)流行性乙型腦炎患兒血漿及腦脊液(cerebr

3、ospinalfluid，CSF)中ET、CGRP含量，研究其含量變化與病情及預(yù)后的關(guān)系，探討ET、CGRP含量變化在乙型腦炎發(fā)病機(jī)制中的作用，從而為臨床早期防治本病提供更多的理論依據(jù)。 方法：選擇2004年7-9月在瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院住院的乙腦患兒45例，按臨床癥狀輕重分為普通型和重型。所有患兒分別在極期及恢復(fù)期常規(guī)采集靜脈血，當(dāng)日分離血清、血漿，并同時(shí)收集腦脊液。對(duì)照組血清、血漿取自22例門診體檢篩查的健康兒童，他們與患兒組

4、在年齡、性別上無(wú)顯著差異性(P＞0.05)。對(duì)照組腦脊液取自非感染性疾病、非神經(jīng)系統(tǒng)疾病、非腫瘤、非自身免疫性疾病、非心臟疾病的15例手術(shù)兒童，其性別、年齡與乙腦患兒組無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。對(duì)照組血清、血漿及腦脊液僅取1次。所有標(biāo)本置于-70℃冰箱凍存，一次性檢測(cè)。用IgM抗體捕獲酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA)檢測(cè)患兒組和對(duì)照組血清特異性IgM抗體。其檢測(cè)的基本原理

5、是：將抗人IgM抗體作為固相抗體，當(dāng)加入血清標(biāo)本時(shí)，其中的特異性IgM抗體可被固相抗體捕獲，再加入特異抗原，使其與固相上捕獲的IgM抗體結(jié)合，接著加入酶標(biāo)記的抗特異性抗原的抗體，然后加入底物顯色，最后根據(jù)目測(cè)法或使用酶標(biāo)比色計(jì)來(lái)判定結(jié)果。采用放射免疫法(radioimmunossay,RIA)檢測(cè)患兒組和對(duì)照組血漿及腦脊液中ET及CGRP的含量。其檢測(cè)的基本原理為：采用競(jìng)爭(zhēng)抑制法，標(biāo)準(zhǔn)品、血漿或腦脊液中ET、CGRP分別與l25I-ET

6、、125I-CGRP共同競(jìng)爭(zhēng)有限量抗體，隨非標(biāo)記ET或CGRP量的增多，與抗體結(jié)合的125I-ET或125I-CGRP的量就減少，采用分離劑(precipitatingreagent，PR)將抗原-抗體結(jié)合物從反應(yīng)體系中分離出來(lái)，測(cè)定其計(jì)數(shù)率，樣品中ET或CGRP的含量可根據(jù)其計(jì)數(shù)率從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出。 結(jié)果：1.特異性IgM抗體檢測(cè)結(jié)果：患兒組血清抗乙型腦炎病毒特異性IgM抗體陽(yáng)性率達(dá)100％，對(duì)照組陽(yáng)性率為0％=0.000)。

7、2.ET的含量：①極期血漿ET含量乙腦患兒普通型組和重型組分別與對(duì)照組之間，以及普通型與重型之間兩兩比較均有顯著性差異(P分別等于0.000、0.000和0.016，F(xiàn)=29.287)；極期腦脊液ET含量三組之間兩兩比較亦有顯著性差異(P分別等于0.012、0.000和0.008，F(xiàn)=11.569)。②恢復(fù)期血漿ET含量三組之間兩兩比較無(wú)顯著性差異(P分別等于0.121、0.062和0.619，F(xiàn)=2.064)；恢復(fù)期腦脊液ET含量普通

8、型組與對(duì)照組比較、普通型組與重型組比較也無(wú)顯著性差異(P分別等于0.489、0.121，F(xiàn)=2.767)，僅重型組仍高于對(duì)照組(P=0.026)。③普通型組血漿ET含量恢復(fù)期與極期比較有顯著性差異(t=4.420，P=0.000)，重型組間比較也有顯著性差異(t=5.572，P=0.000)。④普通型腦脊液ET含量恢復(fù)期與極期比較有顯著性差異(t=2.335，P=0.026)，重型間比較也有顯著性差異(t=3.008，P=0.006)。

9、⑤患兒極期血漿與腦脊液中ET水平變化呈正相關(guān)(t=0.797，P=0.000)。3.CGRP的含量：①極期血漿CGRP含量乙腦患兒普通型組和重型組分別與對(duì)照組之間，以及普通型與重型之間兩兩比較均有顯著性差異(P分別等于0.011、0.000和0.001，F(xiàn)=26.390)；腦脊液CGRP含量三組之間兩兩比較亦有顯著性差異(P分別等于0.000、0.000和0.005，F(xiàn)=31.792)。②恢復(fù)期血漿CGRP含量三組之間兩兩比較無(wú)顯著性差

10、異(P分別等于0.279、0.086和0.433，F(xiàn)=1.550)；腦脊液CGRP含量普通型組與對(duì)照組比較比較也無(wú)顯著性差異(P=0.116)，僅重型組仍高于普通型組與對(duì)照組(P均等于0.000，F(xiàn)=26.519)。③普通型組血漿CGRP含量恢復(fù)期與極期比較有顯著性差異(t=2.201，P=0.032)，重型組間比較也有顯著性差異(t=5.321，P=0.000)。④普通型腦脊液CGRP含量恢復(fù)期與極期比較有顯著性差異(t=5.607，

11、P=0.000)，重型間比較也有顯著性差異(t=5.476，P=0.000)。⑤患兒極期血漿與腦脊液中CGRP水平變化呈正相關(guān)(r=0.430,P=0.007)。(4)極期血漿ET與CGRP水平變化呈正相關(guān)(r=0.464,P=0.001)，極期腦脊液ET與CGRP水平變化呈正相關(guān)(r=0.513，P=0.001)。 結(jié)論：1.乙腦病毒感染時(shí)，患兒血漿及腦脊液中的ET含量明顯升高，并且，腦部感染越重，ET升高越明顯，提示ET參與