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文檔簡介
1、桑黃(Phellinus linteus)是一種珍稀的藥用真菌,多糖是主要活性成分之一,具有免疫調節(jié)、抗腫瘤、抗氧化、降血糖等生物活性和藥理作用。然而,日前國內外研究桑黃多糖還主要以水提物或水提多糖為主,限制了桑黃多糖的深度開發(fā)及應用。本文以桑黃菌絲體為原料,采用不同提取介質連續(xù)制備三種活性多糖,分析和比較多糖的理化性質、分子特性和抗氧化活性,篩選高活性桑黃多糖,研究活性多糖的分離純化、結構表征和生物活性。主要研究結果如下:
2、采用熱水、1%(NH4)2C2O4和1.25 M NaOH/0.05% NaBH4連續(xù)從桑黃菌絲體中得到PL-W、PL-A和PL-N三種活性多糖。理化性質研究表明,PL-W和PL-A主要由葡萄糖組成,PL-N主要由木糖和阿拉伯糖組成且多糖含量和糖醛酸含量最高。PL-W和PL-N主要由高分子量組分構成,而PL-A主要由低分子量組分構成。在水溶液中,三種多糖均呈緊密的無規(guī)線團鏈構象。
通過體外抗氧化模型,研究發(fā)現(xiàn),桑黃菌絲體多糖P
3、L-W、PL-A和PL-N均能較好地清除DPPH、(·)OH、ABTS(·)+自由基和還原三價鐵離子,同時,對H2O2誘導的SH-SY5Y神經(jīng)細胞起保護作用。其中,PL-N較PL-W和PL-A具有明顯的清除自由基能力和體外抗氧化活性,且呈劑效依賴關系,可作為功能性食品應用于膳食、理療中。
利用D-半乳糖所致的動物亞急性衰老模型,綜合評價堿提桑黃菌絲體多糖PL-N的體內抗氧化活性。研究發(fā)現(xiàn),PL-N灌胃40天后,小鼠(胸腺、脾臟
4、、肝臟)臟器指數(shù),肝臟和血清中的抗氧化酶(SOD、GSH-Px、CAT)活性均顯著增加(p<0.05、p<0.01或p<0.001);MDA含量顯著降低(p<0.05、p<0.01或p<0.001);小鼠肝臟中總抗氧化能力(TAOC)能力顯著提高(p<0.05、p<0.01或p<0.001)。這些結果揭示PL-N具有明顯的體內抗氧化活性。
運用DEAE-Sephadex A-25 fast flow柱層析對堿提桑黃菌絲體多糖P
5、L-N進行分離純化,獲得均一活性組分PL-N1。通過酸水解、甲基化、凝膠滲透色譜(GPC)、氣相色譜(GC)、氣質聯(lián)用(GC-MS)、紅外光譜和核磁共振等方法推斷了PL-N1的化學結構,研究表明,PL-N1多糖含量為98.7%,重均分子量(Mw)為343000kDa,主要由阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖組成,分子摩爾比為4.0∶6.7∶1.3∶1.0,骨架結構為(1→4)-β-D-吡喃木糖殘基、(1→2)-α-D-吡喃木糖殘基、(1→4
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