低切應力誘導血管細胞活化激酶C受體1表達及其在細胞增殖中的作用.pdf

1、血管重建（remodeling）是高血壓、動脈粥樣硬化等心血管疾病共同的發(fā)病基礎和基本的病理過程。低切應力（low shear stress，LowSS）與動脈粥樣硬化血管重建的發(fā)生和發(fā)展密切相關，但其力學生物學機制尚未得到徹底闡明。
　　在本實驗室的前期工作中，應用差異蛋白質(zhì)組學方法，對正常切應力（normal shear stress,NSS,15 dyn/cm2）和低切應力（5 dyn/cm2）條件下體外培養(yǎng)的大鼠胸主動脈蛋

2、白質(zhì)表達圖譜進行對比分析,篩選并鑒定出43個差異表達的蛋白質(zhì)，其中活化激酶C受體1（receptor for activated C kinase1,RACK1）在低切應力作用下的血管組織中呈高表達。
　　在此基礎上，本文在細胞水平對RACK1的表達進行驗證，并探討它在血管內(nèi)皮細胞（endothelial cells, ECs）和血管平滑肌細胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）增殖中的作用。應

3、用平行平板流動腔系統(tǒng)，對聯(lián)合培養(yǎng)的大鼠ECs和VSMCs分別施加正常切應力和低切應力，加載時間分別為12和24 h；然后，采用Western blotting技術檢測 ECs和VSMCs的RACK1表達變化。在靜態(tài)條件下，應用RNA干擾技術抑制 ECs和VSMCs的RACK1表達后，用ELISA方法檢測細胞的增殖，Western blotting技術檢測RACK1和磷酸化Akt的表達，以研究RACK1的表達對ECs和VSMCs增殖的影響

4、及其作用機制。
　　結果顯示：①與正常切應力相比，低切應力誘導了聯(lián)合培養(yǎng)ECs和VSMCs的RACK1表達，且低切應力誘導ECs的RACK1表達在先，誘導VSMCs的RACK1表達在后；②抑制ECs和VSMCs的RACK1表達引起細胞的增殖下調(diào)；③抑制ECs和VSMCs的RACK1表達上調(diào)了Akt的磷酸化水平。
　　上述結果表明，低切應力可誘導ECs和VSMCs的RACK1表達，且RACK1的表達變化與細胞增殖相關，提示RA