培美曲塞對人結腸癌HT29細胞的抑制效應及對P21WAFI表達的影響.pdf

1、背景和目的:
　　結直腸癌在我國各地區(qū)的發(fā)病率居高不下。近期研究顯示P21WAFI與結直腸癌的發(fā)生、侵襲、轉移密切相關,同時培美曲塞在多種腫瘤中通過上調P21WAFI產生抗腫瘤作用的研究也先后問世。本研究中培美曲塞不同藥物濃度及時間分別作用于人結腸腺癌細胞HT29后,檢測P21WAFI表達以及該表達對HT29增殖和凋亡的影響。
　　方法:
　　1、RT-PCR、Western blot檢測培美曲塞及5-FU即陽性對照組

2、不同藥物濃度及時間分別作用于HT29后P21WAFI的表達情況。篩選出兩種藥物最佳濃度及作用時間。
　　2、通過MTT比色法,流式細胞技術比較兩種藥物在最佳濃度及作用時間對HT29細胞生物學活性的影響。
　　結果:
　　1、RT-PCR、Western blot提示培美曲塞及5-FU最佳濃度及作用時間均為1000μmol/L、48h。
　　2、最適條件下培美曲塞(1000μmol/L,作用48h)和5-FU(10

3、00μmol/L,作用48h)組中的P21WAFI在RT-PCR中的結果分別是0.93±0.19、0.85±0.15, P<0.05;在Western blot中的結果分別是1.59±0.13、1.31±0.14,P<0.05。
　　3、MTT比色法中培美曲塞(1000μmol/L,作用48h)及5-FU(1000μmol/L,作用48h)組中的OD值分別為0.14±0.07,、0.21±0.06,P<0.05均明顯低于空白對照組

4、0.51±0.11.流式細胞技術檢測凋亡,培美曲塞(1000μmol/L,作用48h)的凋亡率是37.03％,5-FU(1000μmol/L,作用48h)的凋亡率是14.02%,P<0.05,均明顯高于空白對照組5.03%。
　　結論:
　　1、培美曲塞、5-FU對HT29細胞增殖抑制作用及凋亡促進作用可能與P21WAFI上調有關。
　　2、相同藥物濃度及作用時間時,培美曲塞對HT29細胞增殖抑制作用和凋亡促進作用更明