單核細胞趨化蛋白-1、細胞間粘附分子-1在病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團的動態(tài)表達及意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文從以下幾部分進行論述:
  第一部分 單核細胞趨化蛋白-1在病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團的動態(tài)表達及意義
  目的:
  通過建立1型單純皰疹病毒(herpes simplex virus type1,HSV-1)導致小鼠面癱的動物模型,探討單核細胞趨化蛋白-1(monocyte chemoattractantprotein-1,MCP-1)在病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團中表達的變化規(guī)律及糖皮質激素對MCP-1表達

2、的作用。
  方法:
  將170只Balb/c雄性四周齡小鼠隨機分為病毒接種組(135只),生理鹽水對照組(26只)和空白對照組(9只)。病毒接種組中面癱小鼠又分為A、B、C亞組,用于干預的藥物為甲基潑尼松龍琥珀酸鈉(methylprednisolonesodium succinate,MPSS)和糖皮質激素受體阻斷劑(RU486)。A組不進行任何藥物干預,B組為應用MPSS進行干預組,C組為應用MPSS+RU486干預組

3、。將HSV1接種至小鼠耳廓背面皮膚建立面癱動物模型,評估小鼠面神經(jīng)功能,用實時熒光定量PCR(real-time PCR)、蛋白質印跡法(western blot)及免疫組化技術檢測小鼠腦干面神經(jīng)核團中MCP-1的表達。
  結果:
  1.在病毒接種組小鼠中有95只(55.88%)于接種后2-5天出現(xiàn)不同程度的面癱癥狀,取其中65只進入本部分研究。
  2.免疫組化檢測顯示,面癱后MCP-1蛋白在腦干面神經(jīng)核團中神經(jīng)

4、元胞漿、細胞間質表達增強,與空白對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
  3.MCP-1mRNA在生理鹽水組小鼠腦干面神經(jīng)核團表達處于低水平,與空白組相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。在病毒接種組小鼠,面癱后6h可見MCP-1mRNA表達升高,2d達到高峰,與空白對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01),此后表達逐漸降低并趨于正常(P>0.05)。
  4.MCP-1蛋白在生理鹽水組小鼠腦干面神經(jīng)核團表達處于低

5、水平,與空白組相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。在病毒接種組小鼠,面癱后6h可見MCP-1蛋白表達升高,2d達到高峰,與空白對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01),此后表達逐漸降低,但仍高于空白對照組(P<0.05)。
  5.在HSV-1+MPSS組,MCP-1蛋白的表達在面癱后第2天明顯下降(P<0.05)。
  6.在HSV-1+MPSS+RU486組,MPSS對MCP1蛋白表達的抑制作用被減弱(P<0.05)

6、。
  結論:
  1.提示MCP-1參與了HSV-1致小鼠面癱的病理過程。
  2.MPSS對于貝爾面癱的治療作用可能通過對MCP-1的抑制作用來實現(xiàn)。
  第二部分 細胞間粘附分子-1在病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團的動態(tài)表達及意義
  目的:
  探討細胞間粘附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)在病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團中表達的變化規(guī)律

7、及糖皮質激素對ICAM-1表達的作用。
  方法:
  取第一部分實驗中A、B、C組標本進入本部分實驗研究。用實時熒光定量PCR(real-time PCR)、蛋白質印跡法(western blot)及免疫組化技術檢測小鼠腦干面神經(jīng)核團中ICAM-1的表達??瞻讓φ战M標本亦取自第一部分實驗。
  結果:
  1.免疫組化檢測顯示,面癱后ICAM-1蛋白在腦干面神經(jīng)核團神經(jīng)元胞漿、膜表達增強,與空白對照組相比差異有

8、統(tǒng)計學意義(P<0.05)
  2.ICAM-1mRNA在生理鹽水組小鼠腦干面神經(jīng)核團表達處于低水平,與空白組相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。在病毒接種組小鼠,面癱后6h可見ICAM-1mRNA表達升高,2d達到高峰,與空白對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01),此后表達逐漸降低并趨于正常(P>0.05)。
  3.ICAM-1蛋白在生理鹽水組小鼠腦干面神經(jīng)核團表達處于低水平,與空白組相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.

9、05)。在病毒接種組小鼠,面癱后6h可見ICAM-1蛋白表達升高,2d達到高峰,與空白對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01),此后表達逐漸降低,但仍高于正常(P<0.05)。
  4.在HSV-1+MPSS組,ICAM-1蛋白的表達在面癱后第2天明顯下降(P<0.05)。
  5.在HSV-1+MPSS+RU486組,MPSS對ICAM-1蛋白表達的抑制作用被減弱(P<0.05)。
  結論:
  1.提示I

10、CAM-1參與了HSV-1致小鼠面癱的病理過程。
  2.MPSS對于貝爾面癱的治療作用可能通過對ICAM-1的抑制作用來實現(xiàn)。
  第三部分 單核細胞趨化蛋白-1抑制劑-Bindarit對病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團單核細胞趨化蛋白-1、細胞間粘附分子-1表達影響及意義
  目的:
  探討單核細胞趨化蛋白-1抑制劑Bindarit對病毒性面癱小鼠腦干面神經(jīng)核團中MCP-1、ICAM-1表達的影響,確定MCP-

11、1與ICAM-1是否存在相關性。
  方法:
  取第一部分實驗中30只面癱小鼠進入本部分實驗研究。應用Bindarit連續(xù)干預2d后取小鼠腦干面神經(jīng)核團標本。用蛋白質印跡法(western blot)檢測小鼠腦干面神經(jīng)核團中MCP-1及ICAM-1的表達??瞻讓φ战M標本亦取自第一部分實驗。
  結果:
  1.Bindarit干預后,MCP-1蛋白的表達在面癱后第2天明顯下降(P<0.05)。
  2.B

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