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1、中山大學博士學位論文超聲造影劑SonoVue增強超聲輻照介導pEGFPC1AFPtk轉染HepG2細胞的實驗研究姓名:岳殿超申請學位級別:博士專業(yè):影像醫(yī)學與核醫(yī)學指導教師:呂明德20061207》孛蠡太攀撩鼴趣簿論變第一部磐聲落揀(SonoVue)潛強怒聲鞲熙瓣HepG2繃胞膜通逶髏麓影碗一、材料舞秀法蘩凄楚贛黲專瓣涎2霹魏臻潛蔽。人翳畿懿癌纓魏穆HepG2逡孛斑丈孥動魅掌一蚤緩藏露鬟供(AFP鬻甓,ATCC:IIBSt溈5)。聲擎逡
2、澎裁:SonoVue(Braeeo公司,意大剃)。’異硫鬣黢熒光索鈉標記的;i譬旋糖苻(Fluorescentisothioeymlatedextran,FITC,FD500S,Sigma公司,美辮t以PBS配制,濃黢lOmg/ml。彩最多蟄戇整聲痰稼紋(HPViewpoint25瓣,夔鬻≥,楚羲連續(xù)多饕耱搽頭,灝率19MHZ。流式纓縫莰(Elite,Beekmancoutter,美鏊),蓑騖孛波長488nfff,攘收波長520am,功
3、率15mW。察驤方法黧下:●取對數擻長勰培券串麴HepG2細腿,PBS沖洗2次,005%麟黲(禽05搬蠖EDTA)穗穗,終蠡溪鬣毯1000r/tri溆棗5藤箍。疼主薄,瑟禽10%FBS薅莽液熏贛裁簿綏臆慧渡薺璜養(yǎng)3h瑟,謄贛籍孬綴藏懣液,麓入2毒毳臻莽扳肉,繃胞數15105/孔。每孔加入熒光標諏物FD一500S50/1(10mgml)。醞鋪好緞驄懸液磊囂穆錢越聲照射場褥輟照實驗。。●SonoVue滾熬凝:取tralPBS緩漫注入Sono
4、Vue濰手耱瓶褒,囂器豢臻。使題藏震力攘搖滋產黛徽灌?!裾檎彰矍摼Y:A縊(∞s5:踴熬爨滾,不發(fā)射怒聲;B綴(艫5):纘麓憋渡蠢添嬲SonoVueSO越,不避行越辮輻照;e組(艫s):越聲繃照,輻黧甜潤60秒,攆頭頻率19溉,TIS黌鬟兔虢8,瀵鎣舞80%,贛窶聲強iSAT&瓷800mW/emZ:D筑《磚《);瑟黧SonoVue(瓣露鼴B縫)廚,滏褥越矽輾照≤輻慧袋律辯e繾)。綱胞膜通遴憾檢測:輻照蜜驗焱畢,邸剡用PBS戚蕊洗滌、懋
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