不同劑量硝酸銀和滑石粉對胸膜粘連效果以及肺損傷的實驗研究.pdf

1、目的:通過比較不同濃度硝酸銀和滑石粉漿在大鼠氣胸模型中產生胸膜粘連的效果、對肺組織的損傷以及轉化生長因子β1(TGF-β1)在胸膜固定中所起的作用,探討硝酸銀和滑石粉產生胸膜粘連的機制,并且為選擇一種適合于臨床應用的胸膜硬化劑提供理論依據。
　　 方法:健康成年雄性SD大鼠150只,隨機分為對照組(N組,6只)?；劢M(T組,72只)和硝酸銀組(A組,72只)。建立大鼠氣胸模型:(1)對照組胸腔內注入0.9％生理鹽水1ml;(

2、2)A組平均分為A1、A2、A3三個小組,每組24只,A1組注入0.05％硝酸銀1ml,A2組注入0.1％硝酸銀1 ml,A3組注入0.5％硝酸銀1ml;(3)T組平均分為T1、T2、T3三個小組,每組24只,T1組注入500mg/kg滑石粉+0.9％生理鹽水1ml,T2組注入100mg/kg滑石粉+0.9％生理鹽水1ml,T3組注入50mg/kg滑石粉+0.9％生理鹽水1ml。A組和T組分別在第1d、1w、2w、4w(對照組在第1d)

3、時,進行剖胸探查并收集標本,化驗血常規(guī),對大鼠進行胸膜粘連積分、胸膜炎性積分、胸膜纖維化積分及TGF-β1表達的積分光密度值測定。
　　 結果:
　　 1滑石粉組
　　 1.1胸膜粘連積分:三組大鼠胸膜粘連積分均隨注入硬化劑的時間延長而增高。在第四周時各組胸膜粘連積分均達到最大,500mg/kg滑石粉組2.33±0.77,100mg/kg滑石粉組1.83±0.75,50mg/kg滑石粉組1.33±0.52,其中5

4、00mg/kg滑石粉組顯著高于50mg/kg滑石粉組(P＜0.05)。
　　 1.2鏡下炎性積分:三組大鼠炎性反應積分第一周時達到高峰,之后逐漸下降,到第四周胸膜炎性積分與第一天相比無統(tǒng)計學差異(P＞0.05),在第一周時炎性積分分別為:500mg/kg滑石粉組2.83±1.17,100mg/kg滑石粉組2.50±1.05,50mg/kg滑石粉組2.00±1.10,各組間在各觀察點均為無顯著差異(P＞0.05)。
　　

5、1.3三組大鼠胸膜纖維化積分:三組不同濃度滑石粉組大鼠胸膜纖維化積分到第二周時達到高峰值,500mg/kg滑石粉組2.67±0.82,100mg/kg滑石粉組2.00±0.89,50mg/kg滑石粉組1.33±1.07,500mg/kg滑石粉組顯著高于50mg/kg滑石粉組(P＜0.05)。
　　 1.4血中白細胞計數:三種濃度滑石粉組術后第一天白細胞計數均顯著高于對照組(P＜0.05),500mg/kg滑石粉組顯著高于100m

6、g/kg和50mg/kg滑石粉組;術后第一周各組白細胞計數均增高,500mg/kg滑石粉組顯著高于50mg/kg滑石粉組(P＜0.05)。
　　 1.524小時胸腔積液量:500mg/kg滑石粉組1.88±0.78顯著高于100mg/kg滑石粉組1.03±0.59和50mg/kg滑石粉組0.60±0.32(P＜0.05)。
　　 1.6肺組織TGF-β1活性表達積分:三種濃度滑石粉組術后第一天與對照組比較無明顯統(tǒng)計學差異

7、(P＞0.05),各組TGF-β1活性表達積分在第二周時達到高峰值,均顯著高于第一天和第四周時的表達積分,第二周時500mg/kg滑石粉組6.17±1.60,100mg/kg滑石粉組4.00±1.26,50mg/kg滑石粉組3.33±1.63,500mg/kg滑石粉組顯著高于50mg/kg滑石粉組(P＜0.05)。
　　 2硝酸銀組
　　 2.1三組大鼠胸膜粘連積分:三組大鼠胸膜粘連積分均隨注入硬化劑的時間延長而增高。在

8、第四周時各組胸膜粘連積分均達到最大,0.5％硝酸銀組3.50±0.55,0.1％硝酸銀組3.17±0.75,0.05％硝酸銀組1.67±0.52,其中0.5％和0.1％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05)。
　　 2.2三組大鼠鏡下胸膜炎性積分:三組大鼠炎性反應積分第一周時達到高峰,之后逐漸下降,到第四周時胸膜炎性積分與第一天相比無統(tǒng)計學差異(P＞0.05),在第一周時炎性積分分別為:0.5％硝酸銀組3.67±0.

9、52,0.1％硝酸銀組3.33±0.82,0.05％硝酸銀組2.33±1.03。在第一周、第二周和第四周時0.5％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05)。
　　 2.3三組大鼠胸膜纖維化積分:三組不同濃度硝酸銀組術后胸膜纖維化積分均為第一天顯著低于第一周、第二周和第四周三個觀測點,在第四周時胸膜纖維化積分最高,第一天三組纖維化積分比較無明顯差異,第一周0.5％硝酸銀組纖維化積分3.00±0.89,0.1％硝酸銀組2.

10、67±0.81,0.05％硝酸銀組1.17±0.85,0.5％硝酸銀組和0.1％硝酸銀組間比較無顯著差異(P＞0.05),但二者均顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05);在第二周時0.5％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05),0.5％硝酸銀組為3.50±0.84,0.05％硝酸銀組1.83±0.75;第四周時0.5％硝酸銀組3.67±0.52,0.1％硝酸銀組3.33±0.52,0.05％硝酸銀組2.17±1.17,0

11、.5％和0.1％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05)。
　　 2.4血中白細胞計數:三組不同濃度硝酸銀組大鼠術后第一天白細胞計數顯著高于對照組(P＜0.05),0.5％和0.1％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05)。在一周時各硝酸銀組白細胞計數增高,0.5％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組。0.5％硝酸銀組和0.1％硝酸銀組在各觀測點均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　 2.524小時胸腔

12、積液量:0.5％硝酸銀組4.37±1.00顯著高于0.1％硝酸銀組2.20±0.65和0.05％硝酸銀組0.77±0.20,0.1％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05)。
　　 2.6肺組織TGF-β1活性表達積分:術第一天0.5％硝酸銀組顯著高于對照組(P＜0.05),各組均隨時間延長,TGF-β1活性表達亦增強。在第一周和第二周時0.5％和0.1％硝酸銀TGF-β1活性表達積分顯著高于第一天和第四周水平(P＜0

13、.05),第一周時0.5％硝酸銀顯著高于0.05％硝酸銀組,第二周時0.5％和0.1％硝酸銀組顯著高于0.05％硝酸銀組(P＜0.05)。0.5％硝酸銀組和0.1％硝酸銀組在各觀測點均無顯著差異。
　　 2.7術后各組大鼠一般情況:0.05％硝酸銀組大鼠術后第一天精神稍差、可進食少量,術后第二天精神、飲食均基本恢復;0.1％硝酸銀組術后第一天精神差,飲食量少,術后第二天稍有恢復,術后第三天與0.05％硝酸銀組大鼠基本無異;而0.

14、5％硝酸銀組術后第一內死亡4只,其余大鼠精神差,口鼻有出血,不進食,術后第二天死亡2只,其余大鼠精神仍較差,口鼻出血無增加,可進少量水,術后第三天大鼠精神稍有恢復,進食少量。之后大鼠逐漸恢復,第五天時與其余各組基本無異。
　　 3硝酸銀和滑石粉組比較:
　　 3.1胸膜粘連積分比較:在第二周時0.5％硝酸銀組胸膜粘連積分顯著高于各濃度滑石粉組;第四周時0.5％和0.1％硝酸銀組胸膜粘連積分顯著高于各濃度滑石粉組(P＜0.

15、05)。
　　 3.2胸膜炎性積分:0.5％硝酸銀組和0.1％硝酸銀組和500mg/kg滑石粉組在各觀測點均無顯著差異(P＞0.05),在第一周、第二周和第四周時0.5％硝酸銀組顯著高于100mg/kg滑石粉組和50mg/kg滑石粉組(P＜0.05),0.1％硝酸銀組在第一周和第二周時顯著高于50mg/kg滑石粉組(P＜0.05)。
　　 3.3胸膜纖維化積分:第一天時硝酸銀和滑石粉間比較無顯著差異,第一周和第二周時0.

16、5％硝酸銀組、0.1％硝酸銀組和500mg/kg滑石粉組間無統(tǒng)計學差異(P＞0.05),0.5％硝酸銀組顯著高于100mg/kg滑石粉組和50mg/kg滑石粉組;第四周時0.5％和0.1％硝酸銀組顯著高于三種不同濃度滑石粉組(P＜0.05)。
　　 3.4血中白細胞計數:術后第一天和第一周0.5％、0.1％硝酸銀組和500mg/kg滑石粉組均無顯著差異(P＞0.05)。
　　 3.524小時胸腔積液量:0.5％硝酸銀組顯

17、著高于各濃度滑石粉組(P＜0.05),0.1％硝酸銀組和500mg/kg滑石粉組比較無顯著差異(P＞0.05)。
　　 3.6肺組織TGF-β1活性表達積分:0.5％硝酸銀組、0.1％硝酸銀組和500mg/kg滑石粉組在各觀測點均無顯著差異,第一周和第二周時0.5％硝酸銀組顯著高于100mg/kg和50mg/kg滑石粉組(P＜0.05)。
　　 3.7術后各組大鼠一般情況:0.5％硝酸銀組術后死亡率達25％,且術后恢復時

18、間較長(達5天左右),0.1％硝酸銀組和500mg/kg滑石粉組術后均未出現死亡,術后3天基本恢復。
　　 結論:硝酸銀和滑石粉產生胸膜固定術的效果與所用硬化劑的濃度、劑量有一定關系,所用硬化劑濃度高的大鼠組肺損傷程度較大,產生胸膜粘連效果較好。胸膜固定術的主要機制是無菌性炎癥反應以及炎性細胞的黏附過程。而TGF-β1在胸膜粘連過程中起著纖維化形成與發(fā)展的樞紐作用,是滑石粉漿和硝酸銀所致胸膜粘連的關鍵。兩種硬化劑進行比較,0.5