Nrf2-Bach1調控γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶在支氣管哮喘發(fā)病中的作用.pdf

1、背景:
　　γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamylcysteine synthetase,γ-GCS)是谷胱甘肽(glutathione,GSH)合成反應的限速酶,是一種非常重要的抗氧化酶。體外研究認為紅系衍生核因子相關因子-2(NF-E2 related factor2, Nrf2)在核內可以上調抗氧化酶的表達,BTB-CNC異體同源體1(BTB and CNC homology1,Bach1)則下調抗氧化酶的表達。我實

2、驗室前期研究發(fā)現香煙煙霧提取物促進體外培養(yǎng)的氣道上皮細胞Nrf2核轉位并上調γ-GCS的表達。
　　目的:探討Nrf2/Bach1在整體水平調控γ-GCS表達的機制及在支氣管哮喘發(fā)病中的作用。
　　方法:
　　實驗分兩部分。動物實驗部分:38只健康雄性豚鼠隨機分為對照組(A組)、哮喘組(B組)和地塞米松治療組(C組),卵蛋白致敏法復制哮喘模型,檢測三組豚鼠肺組織勻漿中丙二醛濃度。檢測肺組織、肺泡灌洗液中細胞Nrf2、B

3、ach1、γ-GCS mRNA和蛋白質的表達。臨床實驗部分:健康對照組、哮喘患者治療前、治療后均行肺功能檢測。檢測三組血漿丙二醛(MDA)濃度;檢測各組痰細胞中Nrf2、Bach1、γ-GCS蛋白質和mRNA的表達。
　　結果:
　　(1)豚鼠肺組織中丙二醛濃度(nmol/mg.prot)哮喘組高于對照組和治療組(P均<0.05)。哮喘患者血漿丙二醛濃度高于健康對照組和治療后組(P均<0.01)。
　　(2)豚鼠肺組織

4、和BALF細胞中γ-GCSmRNA表達B組低于A組和C組(P均<0.05);Nrf2、Bach1三組間無統計學差異。
　　(3)豚鼠肺組織和BALF細胞中γ-GCS蛋白質表達B組低于A組和C組(P均<0.01);Nrf2蛋白質細胞核內表達B組低于A組和C組(P均<0.01);Bach1蛋白質細胞核內表達B組高于A組和C組(P均<0.01)。
　　(4)哮喘患者痰中細胞內γ-GCSmRNA、蛋白表達及Nrf2蛋白質細胞核內表達

5、治療后高于治療前(P均<0.01),而Bach1蛋白質細胞核內表達治療后低于治療前(P<0.01)。
　　(5)豚鼠肺組織、BALF細胞和哮喘患者痰中細胞內γ-GCS mRNA表達與 Nrf2核內表達呈正相關(P均<0.01),與Bach1核內表達呈負相關(P均<0.01)。
　　結論:
　　氧化/抗氧化失衡在支氣管哮喘發(fā)病中起重要作用,γ-GCS有保護作用。γ-GCS的表達由細胞核內Nrf2和Bach1蛋白水平調控,