乙型肝炎病毒剪接特異性蛋白HBSP與肝細胞泛轉錄表達因子的相互作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、乙型肝炎病毒剪接特異性蛋白(hepatitis B spliced protein,HBSP)是由2447 nt-489 nt單剪接型2.2 Kb HBV剪接變異體編碼產生的一種蛋白。已有研究顯示,它可誘導肝細胞凋亡,與肝硬化發(fā)生呈正相關;HBSP還可誘導特異性CTL活性,導致肝臟損傷。目前該蛋白的具體致病機制仍未闡明,為了更深入了解其致病性,本實驗室在前期研究工作中,以酵母雙雜交篩選的方法獲得了多個與HBSP相互作用的肝細胞蛋白,泛轉

2、錄表達因子(Ubiquitously expressed transcript,UXT)即是其中之一。本研究首先構建pCMVTNT-UXT重組載體,利用TNT兔網(wǎng)織紅細胞裂解物轉錄/翻譯偶聯(lián)系統(tǒng)體外轉錄翻譯UXT蛋白,誘導表達和純化GST-HBSP融合蛋白,通過GST pull-down實驗,證實了HBSP和UXT在體外具有直接相互作用。進一步通過哺乳動物細胞雙雜交,將pBIND-HBSP與pACT-UXT重組質粒和報告基因載體pG5l

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