乙型肝炎病毒剪接特異性蛋白HBSP與肝細(xì)胞泛轉(zhuǎn)錄表達(dá)因子的相互作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、乙型肝炎病毒剪接特異性蛋白（hepatitis B spliced protein，HBSP）是由2447 nt-489 nt單剪接型2.2 Kb HBV剪接變異體編碼產(chǎn)生的一種蛋白。已有研究顯示，它可誘導(dǎo)肝細(xì)胞凋亡，與肝硬化發(fā)生呈正相關(guān)；HBSP還可誘導(dǎo)特異性CTL活性，導(dǎo)致肝臟損傷。目前該蛋白的具體致病機(jī)制仍未闡明，為了更深入了解其致病性，本實(shí)驗(yàn)室在前期研究工作中，以酵母雙雜交篩選的方法獲得了多個與HBSP相互作用的肝細(xì)胞蛋白，泛轉(zhuǎn)

2、錄表達(dá)因子(Ubiquitously expressed transcript，UXT)即是其中之一。本研究首先構(gòu)建pCMVTNT-UXT重組載體，利用TNT兔網(wǎng)織紅細(xì)胞裂解物轉(zhuǎn)錄/翻譯偶聯(lián)系統(tǒng)體外轉(zhuǎn)錄翻譯UXT蛋白，誘導(dǎo)表達(dá)和純化GST-HBSP融合蛋白，通過GST pull-down實(shí)驗(yàn)，證實(shí)了HBSP和UXT在體外具有直接相互作用。進(jìn)一步通過哺乳動物細(xì)胞雙雜交，將pBIND-HBSP與pACT-UXT重組質(zhì)粒和報告基因載體pG5l

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