腸淋巴液引流減輕失血性休克腎損傷的作用與機制.pdf

1、背景：腸淋巴途徑在多器官損傷的發(fā)病學中具有重要作用。腎臟是失血后首先出現(xiàn)低灌注的器官之一。隨著針對微循環(huán)學說進行的液體復蘇，由缺血直接導致休克腎損傷的病例逐漸減少。但是在某些情況下不能及時進行液體復蘇而導致休克腎損傷的情況依然存在，對相關機制的探討有利于持續(xù)低血壓時腎損傷的救治。
　　 目的：本研究通過腸淋巴液引流，觀察腸淋巴液對失血性休克大鼠腎組織形態(tài)及功能的影響，并從胰蛋白酶活性、炎癥反應、能量代謝等角度探討其作用機制，進一

2、步揭示腸淋巴途徑在休克腎損傷發(fā)病學中的意義，為重癥休克的防治提供實驗依據(jù)。
　　 方法：Wistar雄性大鼠18只，隨機均分為假手術組、休克組、休克腸淋巴液引流組(引流組)。所有大鼠經(jīng)戊巴比妥鈉肌肉注射麻醉后，行股部手術，右股靜脈注射肝素鈉全身抗凝，右股動脈插管連接生物信號采集系統(tǒng)，連續(xù)監(jiān)測平均動脈血壓(mean artery pressure，MAP)；左側股動脈插管后連接注射器固定于抽注機上備放血用；腹部手術，剝離腸系膜淋巴

3、管。待所有手術完成、穩(wěn)定30 min后，休克組與引流組大鼠經(jīng)左股動脈勻速放血，10 min內將MAP降至40 mmHg，復制失血性休克模型。假手術組進行相同的手術操作，但不放血。引流組大鼠維持低血壓1h后，行腸系膜淋巴管插管，引流休克腸淋巴液至休克3h。休克組維持低血壓3h、引流組引流休克2～3 h腸淋巴液后、假手術組在相應時間點，經(jīng)腹主動脈取血，制備血漿，檢測腎功能指標尿素(Urea)、肌酐(Cre)以及胰蛋白酶、細胞間黏附分子(in

4、tercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)、晚期糖基化產物受體(receptor of advanced glycation end-products，RAGE)；留取固定位置的腎組織，一部分多聚甲醛固定用于觀察腎組織形態(tài)學變化；另一部分制備組織勻漿用于檢測丙二醛(malondialdehyde，MDA)、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、ICAM-1、RAG

5、E、乳酸(lactic acid，LA)、2，3-DPG、膜泵(ATPase)等指標。
　　 結果：①腸淋巴液引流對失血性休克大鼠腎損傷的作用：組織形態(tài)學觀察表明，假手術組腎小球、腎小管結構正常，休克組可見腎小管上皮細胞壞死，引流組大鼠腎組織損傷較輕；休克組大鼠血漿Urea、Cre含量均顯著高于假手術組，引流組大鼠血漿Urea含量顯著低于休克組。②腸淋巴液引流對失血性休克大鼠與腎損傷相關的血漿指標的影響：休克組大鼠血漿胰蛋白酶活

6、性、ICAM-1與RAGE含量顯著高于假手術組；引流組大鼠血漿胰蛋白酶活性、ICAM-1與RAGE含量顯著低于休克組，且這些指標與假手術組均無統(tǒng)計學差異。③腸淋巴液引流對失血性休克大鼠腎組織勻漿相關指標的影響：休克組大鼠腎組織勻漿LA、MDA、ICAM-1、RAGE、TNF-α、2，3-DPG含量顯著高于假手術組；引流組大鼠腎組織勻漿LA、MDA、ICAM-1、RAGE、TNF-α含量顯著低于休克組，2，3-DPG高于休克組；且引流組大

7、鼠LA、RAGE、TNF-α、2，3-DPG含量高于假手術組、MDA、ICAM-1含量與假手術組無統(tǒng)計學差異；同時發(fā)現(xiàn)，三組大鼠腎組織勻漿Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase活性均無統(tǒng)計學差異。
　　 結論：研究結果表明，休克腸淋巴液引流可減輕持續(xù)失血性休克狀態(tài)大鼠的腎損傷。其作用機制一方面與降低血漿胰蛋白酶活性、降低ICAM-1、RAGE、TNF-α引起的