阿魏酸鈉對順鉑誘導的腎小管上皮細胞凋亡的影響.pdf

1、順鉑是臨床上最常用的化學藥物之一，廣泛應用于各種實體瘤的治療，順鉑劑量依賴性的腎毒性限制其臨床治療腫瘤的效果。順鉑誘導的腎小管上皮細胞的凋亡在順鉑腎毒性中發(fā)揮著重要的作用。利用順鉑誘導腎小管上皮細胞發(fā)生凋亡，研究中藥阿魏酸鈉對腎小管上皮細胞凋亡的影響，探討阿魏酸鈉對順鉑引起的腎毒性的保護機制，為臨床順鉑腎毒性的治療提供理論基礎。 方法：體外培養(yǎng)的正常大鼠腎小管上皮細胞(NRK52E)分為空白、順鉑誘導、不同劑量的阿魏酸鈉保護組，

2、每組設三復孔。選擇50uM順鉑作用24小時作為模型，給予不同濃度的阿魏酸鈉保護，觀察細胞的形態(tài)學，流式檢測細胞凋亡率，TUNEL驗證細胞凋亡，免疫組化和RT-PCR檢測bax，bcl-2蛋白和mRNA的表達。 結果：(1)與對照組相比，50uM順鉑誘導了腎小管上皮細胞凋亡，DAPI染色出現(xiàn)核固縮、核碎裂，流式AnnexinV-PI凋亡率增加，TUNEL證實細胞凋亡(P<0.05)。免疫組化和RT-PCR觀察bax蛋白和mRNA表

3、達上調，bcl-2蛋白和mRNA表達變化不顯著(P<0.05)；(2)與對照組和50uM順鉑誘導組相比，從形態(tài)學和流式細胞術觀察到不同濃度的阿魏酸鈉保護組明顯抑制了順鉑誘導的腎小管上皮細胞凋亡；免疫組化觀察發(fā)現(xiàn)bax蛋白表達下調，bc1-2蛋白表達上調(P<0.05)，RT-PCR．檢測到baxmRNA下調，bc1-2 mRNA上調(P<0.05)。 結論：1．順鉑時間劑量依賴性誘導腎小管上皮細胞凋亡；2．不同濃度的阿魏酸鈉對細