孔雀魚蛋白質感染因子蛋白基因的克隆及功能分析.pdf

1、蛋白質感染因子(proteinaceous infectious agents，Prions)是蛋白本質、導致傳染性海綿樣腦病(transmissible spongiform encephalopathies，TSE)的致病因子，一般指感染因子蛋白(Prion Protein，PrP)的凝聚體。蛋白質感染因子蛋白種類多，物種分布廣。魚類也可能通過飼料蛋白形成魚類Prions和魚類TSE。因此以重要的實驗室魚類孔雀魚為研究對象，對蛋白質

2、感染因子蛋白基因的結構、組織表達及在不同濃度的鹽水中此基因表達情況進行了研究，取得以下結果： 克隆孔雀魚蛋白質感染因子蛋白基因，獲得孔雀魚prpc基因序列。包括基因全長cDNA和對應的基因組DNA片段。cDNA長2,245bp，其開放閱讀框長1.545bp，編碼含515個氨基酸殘基的蛋白。該蛋白具有蛋白質感染因子蛋白全部特征結構：信號肽、基本結構、重復肽區(qū)域、疏水區(qū)域、二硫鍵、糖基化位點和一個糖基縮醛磷肌醇位點(GPI)。高級結

3、構也與已知的其他魚類PrP基本一致。從魚類PrP的進化系統(tǒng)樹中可知道，此次獲得的孔雀魚Prpc屬于PrP-1型魚類蛋白質感染因子。采用染色體步移獲得孔雀魚Prpc對應的基因組DNA片段，長3,720bp。在孔雀魚中該基因是由單個外顯子編碼的，該基因至少包括2個內含子和2個外顯子。 通過半定量RT-PCR檢測孔雀魚Prpc基因在各組織當中的表達情況和在不同濃度的鹽水中的表達情況，結果表明，孔雀魚PrPc基因在腦、眼、肝胰臟、腸、肌