鹽霉素對前列腺癌PC-3細(xì)胞及其干細(xì)胞體外抑制作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察鹽霉素對前列腺癌PC-3細(xì)胞及其干細(xì)胞體外增殖的影響和對腫瘤干細(xì)胞基因表達(dá)的影響；初步探討鹽霉素體外作用于前列腺癌PC-3腫瘤干細(xì)胞的可能機(jī)制。
　　方法：1、用含160、80、40ug/ml等10個不同濃度的鹽霉素作用前列腺癌PC-3腫瘤細(xì)胞，以紫杉醇陽性對照，MTT法檢測出半效濃度（IC50，μg/ml）及最大抑制率（Imax）并繪制腫瘤細(xì)胞生長曲線；2、將對數(shù)生長期的前列腺癌 PC-3細(xì)胞分為空白對照組、溶媒對照組

2、與實驗組，鹽霉素作用24小時后,以“CD133+、CD44+”雙陽性細(xì)胞作為腫瘤干細(xì)胞，通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行干細(xì)胞比例分析并分選；3、提取每組腫瘤干細(xì)胞總的RNA，用micorarray技術(shù)對各組基因表達(dá)進(jìn)行分析，找出表達(dá)差異2倍、10倍及以上的基因，并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：（1）、測得鹽霉素對前列腺癌 PC-3細(xì)胞的IC50為9.18±6.66 ug/ml，Imax=99.35％；（2）、流式細(xì)胞儀分析結(jié)果顯示空白對照組腫瘤

3、干細(xì)胞比例均值為0.83%，溶媒組腫瘤干細(xì)胞比例均值為0.81%，實驗組腫瘤干細(xì)胞比例均值為0.46%，通過兩樣本均數(shù)t檢驗，空白對照組與實驗組之間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05），而空白對照組與溶媒組之間差異不具統(tǒng)計學(xué)意義（p＞0.05）；（3）、micorarray分析結(jié)果顯示，上調(diào)2倍基因1574個，下調(diào)2倍基因1666個，上調(diào)10倍及以上的基因有26個，下調(diào)10倍及以上的基因有21個，其中與腫瘤干細(xì)胞凋亡、生長以及腫瘤耐藥等生