卵巢上皮漿液性腫瘤VEGF、KDR表達(dá)與腫瘤血管生成的關(guān)系.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文卵巢上皮漿液性腫瘤VEGF、KDR表達(dá)與腫瘤血管生成的關(guān)系姓名：劉美娜申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：王敏2002.3.1卵巢交界性漿液性腫瘤9例、OSC38例。患者年齡21—70歲，平均473歲。OSC按FIGO(1986)標(biāo)準(zhǔn)分期，I期7例、Ⅱ期5例、Ⅲ期25例、Ⅳ期1例。組織學(xué)分級I級6例、Ⅱ級13例、Ⅲ級19例。腹水量，500m121例，腹水量500m117例。伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者16例。行淋巴結(jié)清

2、掃術(shù)29例。所有患者術(shù)前均未接受過化療和放療。全部病理組織切片均經(jīng)兩位有經(jīng)驗的病理醫(yī)師盲法確定病理診斷及分級。二、主要試劑VEGF、KDR抗體購自美國StantaCruz公司；CDM抗體及通用型免疫組化S—P試劑盒購自北京中山生物技術(shù)有限公司。三、方法1免疫組化S—P法染色主要步驟：石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，3％H：O：溶液消除內(nèi)源性過氧化物酶，組織抗原電爐煮沸修復(fù)(枸櫞酸鹽緩沖液001tool／L，pH60，10rain)，8％正常山羊血

3、清室溫封閉20min，滴加一抗，40C孵育過夜，滴加通用型生物素標(biāo)記二抗，置濕盒中，37“C孵育20rain，滴加辣根酶標(biāo)記的鏈霉卵自素試劑，置濕盒中，37℃孵育20rain。上述步驟之間均以PBS洗片3次。DAB顯色劑顯色，蘇木素復(fù)染細(xì)胞核，封片。以PBS代替一抗作陰性對照，用已知VEGF、KDR及CD弘陽性的肺癌切片為陽性對照。2結(jié)果判定：21VEGF及KDR判定標(biāo)準(zhǔn)：VEGF及KDR判定標(biāo)準(zhǔn)為胞漿棕染程度。陰性(一)：腫瘤細(xì)胞無著