大黃、赤芍對肝衰竭大鼠肝細胞再生NO調控通路影響的研究.pdf

1、目的：通過實驗研究，探討大黃、赤芍對85％肝切除術后肝衰竭大鼠肝細胞再生NO調控通路影響的研究。
　　方法：采用85%肝葉切除術構建大鼠肝衰竭肝再生模型，SPF級SD大鼠210只，隨機分為7組：正常組30只、假手術組30只、模型對照組30只、大黃注射液組30只、赤芍注射液組30只、大黃赤芍聯(lián)合組30只、促肝細胞生長素組30只。檢測血清ALT、AST、TBiL、PT、NOS、NO； Western blot法檢測肝組織中NOS含量，

2、免疫組織化學法檢測肝組織中NOS的表達情況；檢測肝再生指數(shù)、肝細胞有絲分裂指數(shù)、肝臟增殖指數(shù)、肝組織中PCNA；剩余大鼠用于168h存活率觀察。
　　結果：（1）血清ALT、AST、TBiL、NOS、NO含量測定結果：正常組與假手術組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），組內(nèi)比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。模型組及藥物干預組ALT、AST的峰值在術后12h，隨后逐漸下降，藥物干預組與模型組比較差異有顯著統(tǒng)計學意義（P<0.0

3、1），大黃赤芍聯(lián)合組與促肝細胞生長素組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），從術后24h、36h、48h、72h結果提示，大黃組與赤芍組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。模型組及藥物干預組TBiL的峰值出現(xiàn)在術后24h，大黃赤芍聯(lián)合組與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01），與促肝細胞生長素組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。藥物干預組及模型組血清中NOS、NO的峰值出現(xiàn)在術后12h，于術后36h出現(xiàn)個次峰值，組內(nèi)比較差異有

4、統(tǒng)計學意義（P<0.05），藥物干預組分別與模型組、正常組和假手術組比較差異有顯著統(tǒng)計學意義（P<0.01），大黃赤芍聯(lián)合組與促肝細胞生長素組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。（2）PT測定結果：正常組與假手術組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），組內(nèi)比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。模型組及藥物干預組PT的峰值在術后24h，隨后逐漸下降。模型組和藥物干預組與正常組和假手術組比較差異有顯著統(tǒng)計學意義（P<0.01），藥物干預組

5、與模型組比較差異有顯著統(tǒng)計學意義（P<0.01）。大黃赤芍聯(lián)合組與模型組比較差異有顯著統(tǒng)計學意義（P<0.01），與促肝細胞生長素組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。（3）肝組織中NOS含量及表達:模型組及藥物干預組NOS分別在肝切除術后兩次細胞分裂高峰期前出現(xiàn)高表達，時間點分別為12h、36h，于24h、48h后減弱。（4）肝再生指數(shù)（HMI）：72h、168h時藥物干預組高于模型組，兩者比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），大黃

6、赤芍聯(lián)合組于168h肝再生指數(shù)達79.7±8.2%，促肝細胞生長素組肝再生指數(shù)達82.2±8.5%，兩組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。（5）肝細胞有絲分裂指數(shù)（MI）：模型組及藥物干預組肝細胞有絲分裂于術后24h、48h出現(xiàn)2次高峰，藥物干預組與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），藥物干預組有絲分裂指數(shù)明顯高于正常組和假手術組，差異有顯著統(tǒng)計學意義（P<0.01）。（6）肝臟增殖指數(shù)（PI）：模型組肝臟DNA增殖最高峰出

7、現(xiàn)在術后24h，藥物干預組峰值出現(xiàn)在術后24h、48h，與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），大黃赤芍聯(lián)合組與促肝細胞生長素組比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。（7）肝組織PCNA：模型組及藥物干預組PCNA高峰出現(xiàn)在術后24h，術后48h再次出現(xiàn)個次峰值，隨后下降。模型組和藥物干預組與假手術組和正常組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。組內(nèi)比較，在成模后24h藥物干預組PCNA水平明顯增高（P<0.05），其中以大黃赤芍

8、聯(lián)合組和促肝細胞生長素組最為明顯。（8）成模后168h各組之間的存活率比較：以大黃赤芍聯(lián)合組和促肝細胞生長素組療效最佳，大黃組、赤芍組療效其次，最差為模型組。
　　結論：（1）大黃、赤芍能改善肝葉切除術后肝衰竭大鼠的肝功能、凝血功能，提高大鼠生存率。（2）大黃、赤芍具有提高肝組織中 NOS在12h、36h表達強度的作用。（3）從肝再生指數(shù)、肝細胞有絲分裂指數(shù)、肝臟增殖指數(shù)和PCNA水平的表達等實驗數(shù)據(jù)，推斷大黃、赤芍具有促進肝衰竭