疏筋解毒方對6-OHDA大鼠內質網應激轉錄表達干預的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 檢測疏筋解毒方對帕金森模型大鼠黑質多巴胺能神經元內質網應激信號轉導蛋白基因表達的影響，探討其抑制黑質多巴胺能神經元細胞凋亡的可能機制。
　　 方法：
　　 采用大鼠腦立體定位注射6-羥基多巴胺方法建立帕金森模型，按照分層隨機分組方法分為假手術組（S）、模型組（M）、西藥組（W）、中藥組（C）,藥物干預1d、7d、14d、21d、30d 進行大鼠行為學觀察；灌胃治療14d、21d、30d、45d、60

2、d分期采用RT-PCR 技術檢測各組GRP78 mRNA、Caspase-12 mRNA表達；運用免疫組化法檢測各組大鼠黑質GRP78、Caspase-12表達。
　　 結果：
　　 1．疏筋解毒方對帕金森病大鼠行為學的影響
　　 采用西藥、中藥治療7d后平均轉速和持續(xù)時間改善有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；與西藥組比較，中藥組在持續(xù)時間上改善明顯，14d、21d、30d 均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；且中藥組作

3、用持久，治療7d、14d、21d、30d均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　 2.疏筋解毒方對PD大鼠中腦黑質GRP78 mRNA、Caspase-12 mRNA表達水平的影響
　　 GRP78 mRNA表達水平結果顯示：模型組14d、21d、30d 逐漸上升,45d、60d逐漸下降，與模型組比較，中藥組30d 下降具有顯著性差異（P<0.01）；中藥組60d上升、西藥組45d上升有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；與西藥組

4、比較，中藥組45d下降有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Caspase-12 mRNA表達水平結果顯示：模型組14d、21d、30d、45d逐漸上升，60d下降；與模型組比較，中藥組45d下降具有顯著性差異（P<0.01）；中藥組30d下降，西藥組30d上升有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；與西藥組比較，中藥組45d下降具有顯著性差異（P<0.01）。
　　 3.疏筋解毒方對PD大鼠黑質內GRP78、Caspase-12蛋白表達的影響<

5、br>　　 GRP78蛋白表達隨時間改變,30d達峰值，與同組前期比較，模型組、西藥組、中藥組具有顯著性差異（P<0.01）；與模型組比較，中藥組30d、45d、60d具有顯著性差異（P<0.01)；與西藥組比較，中藥組30d下降具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Caspase-12蛋白表達隨時間改變,45d達峰值，與同組前期比較，模型組、西藥組、中藥組30d上升具有顯著性差異（P<0.01），與模型組比較，中藥組30d、45d、60d

6、具有顯著性差異（P<0.01），與西藥組比較，中藥組30d、60d下降具有顯著性差異（P<0.01）。
　　 結論：
　　 1.6-OHDA注射毀損法制備偏側PD大鼠模型，癥狀在14d后出現明顯變化，而疏筋解毒方在7d時即可表現出改善癥狀，尤其在改善持續(xù)時間上效果明顯且持久。
　　 2.疏筋解毒方具有雙向調節(jié)黑質DA能神經內質網膜伴侶蛋白GRP78，既能防止早期表達水平過高，上升過快而導致應激損傷，又能調節(jié)后期下