血根堿對細胞的增殖抑制和凋亡誘導作用研究.pdf

1、目前肝癌和胃癌病發(fā)率在亞洲較為突出。治療手段主要是手術輔助化療,但是化療的耐藥性成為治療過程中新的難題。因此,從中藥中尋找抗癌藥物成為當前研究的熱點。血根堿(Sanguinarine,SA)是提取自博落回等植物中的一種苯菲啶類生物堿,具有抗癌活性。為了能進一步探討血根堿抗癌作用,本課題選擇人胃癌細胞株BGC-823細胞和人肝癌細胞株SMMC-7221細胞作為研究對象,通過光學倒置顯微鏡觀察藥物作用前后的細胞形態(tài)變化,直觀的看出SA對腫瘤

2、細胞具有明顯的增殖抑制作用;臺盼藍拒染試驗和二苯基溴化四氮唑藍(MTT)實驗,結果表明血根堿對細胞具有明顯的抑制作用。在一定范圍內,隨著藥物濃度的增大,作用時間的延長和細胞濃度的減小,細胞增殖抑制作用增強,最高抑制率最高超過90％;Hochest 33258染色實驗,結果表明隨著藥物濃度的增大,細胞的早期凋亡率增大,同時,細胞體積變小,細胞染色質濃縮;在流式細胞儀(FCM)檢測對血根堿作用腫瘤細胞的細胞周期和細胞凋亡情況,結果表明隨著藥

3、物濃度的增大,作用時間的延長,細胞早期凋亡率升高,細胞各個時期的DNA含量變化明顯,血根堿使BGC-823細胞阻滯于G1/G0期,而將SMMC-7221細胞阻滯于G2/M期。為了進一步佐證血根堿抑制細胞增殖,改變細胞周期和誘導細胞凋亡與相應的凋亡蛋白有關,我們通過Western Blot試驗對凋亡相關蛋白Bcl-2和Bax表達進行檢測,試驗結果表明隨著血根堿濃度逐漸增大,SMMC-7221細胞和BGC-823細胞的Bcl-2/Bax都逐