硫酸粘桿菌素菌種選育與發(fā)酵工藝研究.pdf

1、粘菌素又名粘桿菌素、克利斯汀(colistin)、多粘菌素E(Polymyxin E)、抗敵素等,是由多粘桿菌培養(yǎng)液中獲得的堿性瑣環(huán)狀多肽類(polypeptide)抗生素,為多粘菌素E1和E2的混合物。為白色結晶或結晶性粉末,微溶于水,不易潮解。其硫酸鹽硫酸粘菌素性質十分穩(wěn)定,為白色粉末,易溶于水,微溶于甲醇、乙醇,不溶于丙酮、乙醚等。在pH值為2—6范圍內相當穩(wěn)定。耐熱,消化道不易吸收,排泄迅速、毒性小,無副作用,不易產生耐藥菌株,

2、是最安全的畜禽促生長抗生素之一。本課題根據硫酸粘菌素的生物合成特點,運用UV照射、NTG誘變以及抗結構類似物α-氨基丁酸等手段進行菌種選育。研究了以多粘類芽胞桿菌(Paenibacillus polymyxa)6#作為出發(fā)菌株,經過紫外線誘變選育,獲得了一株遺傳性能穩(wěn)定且硫酸粘菌素發(fā)酵單位比出發(fā)菌株提高15%的新菌株37#。然后又對該菌株再采用亞硝基胍(NTG)誘變,以纈氨酸結構類似物氨基丁酸作為篩選因子又得到一株新的產量提高18%的菌

3、株42#,對此新的高產菌株在搖瓶條件下的工藝進行了研究。主要內容包括種子培養(yǎng)時間、接種量、初始pH值、培養(yǎng)溫度、碳源、氮源、C/N比等進行優(yōu)化,確定了優(yōu)化后的培養(yǎng)基C源為葡萄糖10%與淀粉90%的復合C源,N源為無機N源硫酸銨0.1%與有機N源麥胚粉0.3%相結合的復合N源,C源、N源最佳的比例為2.5：1。種子最佳培養(yǎng)時間為20~24小時,最適宜的接種量為6%,初始pH控制在6.4~6.6最佳。在搖瓶試驗的基礎上進一步在18噸發(fā)酵罐上