伏安分析技術在基因擴增監(jiān)測及孔雀石綠、己烯雌酚檢測中的應用.pdf

1、論文研究電化學伏安技術在食品質(zhì)量控制與環(huán)境監(jiān)測方向上的應用。本文主要分兩個部分：1.采用基因分析方法檢測食品、環(huán)境中微生物時，應用伏安技術監(jiān)測DNA擴增進程與結果。2.電化學伏安傳感器快速檢測孔雀石綠(MG)和己烯雌酚(DES)的機理與應用。
　　 第一部分：環(huán)介導等溫基因擴增(LAMP)技術的出現(xiàn)解決了基于核酸的分子生物學研究諸多難題，使快速、廉價診斷成為可能。課題通過將其與高靈敏度電化學檢測技術結合起來，使上述可能變成現(xiàn)實。

2、主要內(nèi)容如下：首先構建出幾何參數(shù)適用、高重現(xiàn)性、高靈敏的電化學傳感器體系，其次建立大腸桿菌(E.coli)中特征基因片段的LAMP方法。在此基礎上，系統(tǒng)研究LAMP擴增體系中內(nèi)源反應物分子的伏安行為、電極機理以及其伏安參數(shù)隨擴增反應進展而產(chǎn)生的變化。接著遴選出指示信標分子，探索其電化學響應與LAMP擴增即時結果(產(chǎn)物量)間的關系，進而得到相應反應條件下信標分子伏安響應值與DNA初始模板量間的內(nèi)在聯(lián)系。最后，構建一種快速基因分析新模式--

3、通過電化學實時監(jiān)測LAMP進程中信標分子的變化量來反演DNA初始模板定性、定量信息。該結果為建立基于基因分析的微生物快速檢測方法奠定理論基礎。
　　 第二部分：水產(chǎn)品及漁業(yè)環(huán)境中有毒有害物質(zhì)(比如MG和DES)殘留不僅帶來了嚴重的生態(tài)問題，而且已成為影響食品質(zhì)量安全和國際市場競爭力的重要因素，因此，對其殘留的檢測與監(jiān)控就顯得格外重要。論文研究了這兩種物質(zhì)在功能電極上的伏安響應機理，并建立了相應檢測方法，應用于水樣中該目標物質(zhì)的測