影響微生物培養(yǎng)基質量的關鍵因素研究.pdf

1、近年來國內外食品微生物檢驗與控制技術發(fā)展迅猛，高靈敏度、高特異性的微生物快速檢測方法和商品化產品越來越多地走進食品微生物實驗室。但是無論檢驗技術如何發(fā)展，培養(yǎng)基仍然是技術的核心與關鍵所在。因此，培養(yǎng)基的質量是微生物檢測工作的基礎，事關檢測結果的準確性、可靠性。培養(yǎng)基的制備和使用更是微生物檢測工作的重要環(huán)節(jié)。培養(yǎng)基自身質量的優(yōu)劣、保存是否得當、配制使用是否正確等都對微生物的生長、分離、鑒定及檢驗結果的正確與否起著至關重要的作用。由于微生物

2、培養(yǎng)基質量穩(wěn)定性是由諸多因素造成的。只有了解了不同因素對微生物培養(yǎng)基質量穩(wěn)定性所造成的影響，才能對微生物培養(yǎng)基進行有效的監(jiān)控，從根本上保證微生物檢測結果的可信和有效。
　　本文首先通過對培養(yǎng)基配制過程中影響培養(yǎng)基 pH值穩(wěn)定性的因素進行分析，了解了各因素對培養(yǎng)基pH值的影響。從實驗結果來看，培養(yǎng)基 pH值的變化隨著測量時溫度的降低而升高。培養(yǎng)基中含胨量的高低與pH值變化的絕對值呈反比關系，而含糖量的高低與其呈正比關系。不同滅菌溫度

3、和滅菌前是否加入校準試劑對培養(yǎng)基 pH變化平均值均具有統(tǒng)計學意義。由此可見，測量 pH值時的溫度、培養(yǎng)基成分、滅菌溫度與時間、滅菌前是否加入校準試劑等對培養(yǎng)基 pH值穩(wěn)定性均有不同程度的影響。
　　其次，在了解了各因素對培養(yǎng)基 pH值的影響之后，本研究對不同pH值的培養(yǎng)基在不同培養(yǎng)溫度下微生物檢測結果進行了研究。研究采用最為常用的平板計數瓊脂培養(yǎng)基及革蘭氏陰性菌（沙門氏菌）和革蘭氏陽性菌（金黃色葡萄球菌）各一株。發(fā)現金黃色葡萄球菌

4、和沙門氏菌在培養(yǎng)基pH值為6.5-7.0、培養(yǎng)溫度為36±1℃的范圍中檢出率最高。隨著培養(yǎng)基 pH值和培養(yǎng)溫度的升高或降低檢出率呈下降趨勢。培養(yǎng)基pH值為6.0-7.5及培養(yǎng)溫度為28±1℃和36±1℃時的檢測結果間均不存在顯著差異。就不同的微生物來說，金黃色葡萄球菌較沙門氏菌對培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)pH值的變化更敏感。
　　再次，本研究就培養(yǎng)基經加熱溶解不同次數后對微生物檢測結果的影響進行了研究。選擇了較為常用的平板計數瓊脂和伊紅美藍瓊

5、脂作為供試培養(yǎng)基，選用金黃色葡萄球菌和大腸埃希氏菌進行驗證實驗。結果顯示，隨著培養(yǎng)基加熱溶解次數增加，培養(yǎng)基 pH值不斷下降。平板計數瓊脂在經過反復凍融后 pH值下降幅度較伊紅美藍更大。由于培養(yǎng)基經過反復多次的加熱過程中使得大量的水分揮發(fā)，蛋白質等營養(yǎng)物質也被破壞或丟失，培養(yǎng)基 pH值不斷下降，使得微生物生長繁殖受到了抑制甚至不能生長。實驗結果證實了隨著培養(yǎng)基加熱溶解次數的增加微生物檢測結果偏差率呈上升趨勢。
　　最后，本研究經不

6、同儲存溫度、時間及不同包裝方式對培養(yǎng)基在不同條件下儲存后對微生物檢測結果的影響進行了研究，結果發(fā)現儲存5天內的培養(yǎng)基對檢測結果并無顯著影響（P＞0.05）。實驗結果顯示，以瓶裝方式儲存的培養(yǎng)基微生物檢測結果誤差最小且保存的時間能相對更久的實驗結果充分說明了控制水分及有效成份的揮發(fā)是適當延長培養(yǎng)基保存期的關鍵所在。
　　本文研究顯示，微生物培養(yǎng)基的pH值、加熱溶解次數、不同的儲存條件對培養(yǎng)基的質量都會造成不同程度的影響。并且各因素間