耐低磷轉錄因子GmPTF1表達載體構建及轉化大豆研究.pdf

1、磷對于大豆新陳代謝和生長發(fā)育具有重要作用,缺磷將使大豆營養(yǎng)器官生長受到嚴重抑制。本研究在已克隆轉錄因子GmPTF1基礎上,構建基因的真核表達載體,轉化擬南芥,研究基因的生物學功能;同時,利用農桿菌介導與花粉管通道轉化技術,將GmPTF1轉入不同大豆品種,創(chuàng)制轉基因新材料,為培育耐低磷新品種提供重要資源。主要研究結果如下:
　　 1.構建了轉錄因子GmPTF1真核表達載體:采用植物超表達載體pGN與無標記(Marker-free)

2、表達載體pX6,構建完成轉錄因子基因GmPTF1的超表達載體pGN-GmPTF1和無標記表達載體pX6-GmPTF1。
　　 2.研究了轉錄因子GmPTF1在擬南芥中的生物學功能:利用農桿菌介導技術將pGN-GmPTF1和pX6-GmPTF1轉入擬南芥,獲得了轉有pGN-GmPTF1的T2代植株;經分析T2代擬南芥與野生型發(fā)現,超表達轉基因擬南芥在低磷脅迫處理下的生長狀況優(yōu)于野生型,表明GmPTF1具有提高擬南芥耐低磷的作用。<

3、br>　　 3.完成了耐低磷轉錄因子GmPTF1轉化不同大豆品種:利用農桿菌介導與花粉管通道轉化技術,將表達載體pGN-GmPTF1和pX6-GmPTF1分別轉化冀豆12、冀豆16、五星1號和魯冠豆1號,經PCR檢測獲得了65棵T0,13棵T1(9個株系),38棵T2(6個株系)和3棵T3代(2個株系)陽性植株。
　　 4.獲得了6個轉GmPTF1基因大豆新材料:經PCR、RT-PCR與基因測序分析,證實耐低磷轉錄因子GmPT