植物提取物XpP-1和紫草素的抗炎作用及機制研究.pdf

1、目的：探索植物提取物Xpp-1和紫草素的抗炎作用及相關機制，為抗炎藥物開發(fā)提供一定的研究基礎。
　　方法：脂多糖(LPS)刺激小鼠腹腔巨噬細胞作為研究Xpp-1抗炎作用的體外細胞炎癥模型;CpG寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)刺激小鼠腹腔巨噬細胞作為研究紫草素抗炎作用的體外細胞炎癥模型;MTT法檢測Xpp-1和紫草素對小鼠腹腔巨噬細胞的毒性作用;熒光定量PCR檢測Xpp-1和紫草素預處理對炎癥模型細胞促炎癥細胞因子mRNA水平影響

2、;酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測Xpp-1預處理對炎癥模型細胞促炎癥細胞因子蛋白水平的影響;免疫印跡法檢測Xpp-1和紫草素對炎癥模型細胞NF-κB和MAPK信號通路活化的影響;利用小鼠體內實驗，ELISA檢測Xpp-1對LPS誘導的炎癥小鼠外周血中促炎癥細胞因子產(chǎn)生的影響;病理組織切片觀察Xpp-1對LPS誘導的炎癥小鼠肺組織損傷的影響;觀察Xpp-1對LPS誘導的炎癥小鼠在72小時內的存活率的影響。
　　結果：植物提取物X

3、pp-1(6.25-25μM)和紫草素(1-2.5μM)濃度范圍內對小鼠腹腔巨噬細胞沒有明顯的毒性作用;在LPS刺激的小鼠腹腔巨噬細胞中，Xpp-1（12.5μM）對IL-1β、TNF-α和IL-6在mRNA水平和蛋白水平都有抑制作用(P＜0.05)，并抑制 NF-κB途徑的IKKα/β和NF-κB的磷酸化;在CpG-ODN刺激的小鼠腹腔巨噬細胞中，紫草素(2μM)抑制TNF-α、IL-1β、IL-12p40mRNA表達(P＜0.05)

4、，并抑制NF-κB途徑的IKKα/β和NF-κB的磷酸化及MAPK途徑的JNK的磷酸化。
　　體內實驗中，在LPS誘導的炎癥小鼠中，Xpp-1(5mg/kg)抑制外周血中促炎癥細胞因子IL-1β、TNF-α和IL-6的產(chǎn)生(P＜0.05)，減少肺組織炎癥細胞浸潤，提高小鼠72小時內存活率(P＜0.05）。
　　結論：植物提取物Xpp-1抑制LPS刺激的小鼠腹腔巨噬細胞IL-1β、TNF-α和IL-6的產(chǎn)生，相關機制可能與抑制