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文檔簡介
1、目的:通過對艾葉中總黃酮成分進行提取,并建立含量測定方法;以及對艾葉中的黃酮單體化合物及其他化學(xué)成分進行提取、分離、結(jié)構(gòu)鑒定,為進一步系統(tǒng)研究艾葉的化學(xué)成分及藥理毒理作用提供依據(jù),為艾葉有效化學(xué)成分的大量提取制備和深入開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
方法:本研究是在查閱大量相關(guān)文獻的基礎(chǔ)上,通過對文獻報道的艾葉化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)特點和化學(xué)性質(zhì)進行綜合分析后擬定實驗方法。首先以乙醇浸漬法提取艾葉中的總黃酮成分,濃縮成浸膏。將浸膏進行處理獲得預(yù)試
2、品,并制成溶液,用亞硝酸鈉和硝酸鋁顯色,于紫外分光光度計下測定吸光度值,進而計算出艾葉樣品中總黃酮含量。對顯色劑的加入時間、溶液pH值等影響因素進行分析,選擇最佳試驗方法并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并對此方法進行方法學(xué)考察,從而建立艾葉中總黃酮含量測定方法。然后再以不同極性的溶劑(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇)對總黃酮浸膏進行萃取分離。其中對艾葉的乙酸乙酯層萃取物分別采用硅膠柱層析,凝膠柱層析Sephadex LH-20,凝膠滲透柱色譜Toyopeal
3、 HW-40,制備薄層色譜以及制備高效液相色譜等方法進行分離純化,得到單體化合物。運用1H-NMR,13C-NMR和二維核磁共振等現(xiàn)代波譜技術(shù)對單體化合物的結(jié)構(gòu)進行綜合解析和鑒定。
結(jié)果:通過影響因素和相關(guān)方法學(xué)考察,確定了艾葉中總黃酮含量測定方法,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線為:A=0.0118C+0.0133,r=0.9991,在5.800~58.000μg/ml范圍線性關(guān)系良好。該含量測定方法準(zhǔn)確度、精密度、重現(xiàn)性良好,且在30mi
4、n內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。同時,從艾葉的乙酸乙酯提取部位中共分離得到4個單體化合物,通過鑒定,其結(jié)構(gòu)分別為5,7,3’-三羥基-3,6,14’-三甲氧基黃酮醇(1),5,7-二羥基-3,3’,6,4’-四甲氧基黃酮醇(2),東莨菪內(nèi)酯(3),對羥基苯甲醛(4)。其中化合物(1)和(2)為黃酮醇類化合物,化合物(3)為香豆素類,化合物(4)為芳香類小分子化合物。經(jīng)過文獻檢索,化合物(1)和(2)為首次從艾葉中分離得到。
結(jié)論:本
5、研究利用亞硝酸鈉和硝酸鋁顯色原理,紫外分光光度法測定而建立了艾葉中總黃酮的含量測定方法,該方法簡便快速、準(zhǔn)確穩(wěn)定、重現(xiàn)性好。在此基礎(chǔ)上采用多種天然藥物化學(xué)提取分離方法,繼續(xù)對艾葉中總黃酮及其他化學(xué)成分進行分離純化,并利用現(xiàn)代波譜技術(shù)對所分離化合物進行結(jié)構(gòu)鑒定,最終確定4種單體化合物。對比文獻,本研究使用的方法更具有可操作性,與傳統(tǒng)的醇一水系統(tǒng)提取方法相比,更為準(zhǔn)確有效。本研究中所提取分離的化合物(1)和(2)為黃酮醇類化合物,且為首次從
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