生防菌淡紫擬青霉多糖的分離、純化及結構分析.pdf

1、篩選到一株對枯萎病病原菌.尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum)具有拮抗抑制作用的淡紫擬青霉(Peacilomyces ilacinus)菌株NH-PL-03，抗性物質初步篩選結果表明其胞外粗多糖具有抑菌活性。本論文對該菌株的胞內、外多糖進行了提取、純化研究，并對純化所得的兩個單組分多糖IP-1和EP-1進行了結構分析以及抑菌活性測定。主要研究內容與結果如下： l、通過形態(tài)學和rDNA-ITS序列分析，鑒定出分離保存

2、的菌株為淡紫擬青霉。對其培養(yǎng)特性進行了研究。 2、淡紫擬青霉發(fā)酵液的胞內、胞外物質經過醇析法加乙醇3倍即可得到多糖粗提物。經過測試反應驗證，該粗提物為多糖，并具有凝膠多糖的理化特性。進一步的分離實驗中，發(fā)現(xiàn)經Sevage法脫蛋白3～5次后，可以使淡紫擬青霉粗多糖中的蛋白質含量低于0.62％。脫蛋白后的胞內、外粗多糖經凝膠柱層析純化后各自得到一個組成分IP-1和EP-1，紫外光譜檢測兩者已不含蛋白質、核酸等非多糖類物質。純化后的淡

3、紫擬青霉多糖同樣具有凝膠多糖的特性。 3、在對淡紫擬青霉胞內、外多糖IP-1和EP-1的分子結構分析中，證明兩者均是以1→3葡萄糖苷鍵連接的單一單糖組分的無分支結構的多聚葡萄糖；Sephacryl S-200 HR凝膠層析求得IP-1和EP-1樣品的平均分子量分別為24.4KD和35.2KD；剛果紅結合實驗結果表明IP-1和EP-1樣品在稀堿溶液中(濃度<0.3mol/L)存在三股螺旋構象。IP-1和EP-1的分子結構為：