大鼠脛神經損傷后遠側端髓鞘和軸索再生及他克莫司納米微球局部緩釋用藥研究.pdf

1、Ⅰ.大鼠脛神經損傷后遠側端髓鞘和軸索再生的研究
　　立題背景:英國生理學家Waller(A.V.Waller1816-1870)早在1850年就發(fā)現(xiàn)周圍神經切斷后,其神經遠端會由近及遠直至神經末端出現(xiàn)順行性潰變，遠端神經發(fā)生潰變以后，近端神經再由近及遠向潰變遠端神經內生長，并逐漸取代原來的神經組織，即神經再生。神經切斷以后遠段神經會發(fā)生變性，是沃勒首先報道的，故稱沃勒潰變或沃勒變性（Wallerian Degeneration）[

2、1,2]。
　　已知中樞神經系統(tǒng)神經元在分化成熟后不具備分裂增殖能力，而周圍神經損傷后，可由靜態(tài)相進入增殖相，具備再生能力。1984年哥德堡博士（Goldberg MD）[3]用肌電圖檢查周圍神經損傷后神經再生質量時發(fā)現(xiàn)，肌電圖檢查結果與神經功能恢復結果不一致，即電生理評價結果與臨床神經功能恢復存在較大差異,盡管電生理結果顯示神經生長恢復到正常值的80％，但神經功能恢復僅為40-60%。動物實驗表明，將大鼠坐骨神經切斷再原位縫合，

3、結合使用營養(yǎng)神經的藥物后，盡管肉眼可見縫合口處神經生長平整，仍出現(xiàn)足底皮膚潰瘍、肌萎縮及肌力減弱或肌無力，而肌電圖檢測的運動傳導速度指標卻顯示良好。神經修復研究亦表明，神經再生的電生理評價結果與臨床神經功能恢復存在較大差異。為了反映神經功能恢復狀態(tài)，并從不同角度對神經再生作出觀察評價，我們采用神經原位橋接術式修復損傷神經方法作為動物模型，從組織學、生理學角度把神經纖維分成髓鞘和軸索兩部分進行對比檢測，并在縫合口遠側神經干上設置多個檢測點

4、，采用神經電生理和組織形態(tài)學染色等方法來判斷神經再生。
　　目的：1.應用電生理、神經示蹤和髓鞘組織化學方法，探討大鼠脛神經損傷時髓鞘和軸突再生速度是否一致；2.探討在神經再生的研究中，電生理與臨床功能恢復存在差異以及電生理指標不能恢復到正常狀態(tài)的原因。
　　方法：1.選用Wistar大鼠54只，神經原位橋接動物模型，按手術先后分為患側的實驗組和健側的正常對照組；2.實驗組根據(jù)縫合口遠段熒光示蹤劑注射點和取材點的部位不同，設

5、為10mm距離組和30mm距離組，每組6只。分別在術后4周、8周、12周進行熒光劑示蹤、髓鞘形態(tài)、電生理、高清晰度彩色醫(yī)學圖文分析系統(tǒng)檢測。
　　結果：1.于實驗8周及12周L3-L6脊神經節(jié)內有熒光標記細胞，30mm距離組明顯少于10mm距離組，P<0.01,差異有顯著性；2.在患側8周、12周其損傷神經遠側已有大量排列有序的有髓神經纖維10mm距離組與30mm距離組之間，P>0.05；3.其運動神經傳導速度，實驗組4周與8周、

6、12周之間相比，P<0.01，有顯著性差異；8周與12周之間相比，P>0.05，差異無統(tǒng)計學意義。
　　結論：1.電生理結果與神經纖維中的髓鞘數(shù)量密切相關；2.髓鞘和軸索生長速度出現(xiàn)不一致。提示電生理能反映髓鞘電傳導通道的建立，但不能直接判斷軸索的化學傳導通道建立和神經的支配特性。
　　Ⅱ.他克莫司納米微球局部緩釋用藥對神經損傷后遠端髓鞘和軸索再生影響的應用研究
　　目的：觀察大鼠脛神經損傷后局部短暫應用他克莫司（FK

7、506）納米微球緩釋顆粒對神經再生的影響。
　　方法：建立左側脛神經切斷的端端縫合模型，將 Wistar大鼠36只，隨機分為用藥的實驗組和損傷對照組。實驗組根據(jù)兩個緩慢釋放用藥時間不同分為實驗10d組和實驗15d組，每組6只，于術后2周、3周分別取縫合口遠側端神經干做變性軸索、變性髓鞘染色，結合神經髓鞘染色、HE染色，觀察其變性軸索、變性髓鞘、再生髓鞘纖維數(shù)和觀察影響局部用藥的降解因素。
　　結果：2周及3周時縫合口遠側端神