Th17細胞在胃癌患者中的檢測及其富集作用因素的初探.pdf

1、目的：
　　檢測胃癌患者癌組織和外周血單個核細胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中Th17相關細胞因子和轉錄因子的表達含量，分析Th17細胞及其相關因子在胃癌發(fā)生、發(fā)展過程中的作用
　　方法：
　　1）66例胃癌患者，50例健康志愿者外周血和組織標本均來自鎮(zhèn)江市第一人民醫(yī)院，所有患者標本的采集均記錄了就診時間、性別、年齡、病理組織分型等臨床病理資料，患者進入研究前無任何放

2、療、化療以及其他藥物干預；
　　2）分離外周血單個核細胞 PBMC(1×106/cells)，應用PMA(50 ng/ml)+Ionomycin(1μg/ml)+Monensin(500 ng/ml)刺激培養(yǎng)6 h。提取RNA逆轉錄成cDNA，采用qRT-PCR方法檢測外周血PBMC中CD4+T細胞主要轉錄因子RORγt、T-bet以及相關細胞因子IL-17A、IL-21、IL-1β、IFN-γ mRNA的表達水平；
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3、）提取患者腫瘤組織中的RNA，應用qRT-PCR方法檢測Th細胞相關轉錄因子和細胞因子IFN-γ, IL-17, T-bet和RORγt的mRNA表達水平，并通過直線相關分析方法對組織和外周血中細胞因子表達水平進行相關性分析；
　　4）采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)方法檢測胃癌患者血漿中IL-21和IL-1β水平。
　　結果：
　　1）與健康對照組比較，胃癌患者和胃癌轉移者外周血PBMC中Th17、Th1細胞相關的

4、轉錄因子RORγt與T-bet的表達均增高，但只有RORγt增高具有統計學差異(p<0.05)。
　　2）與健康對照組相比胃癌患者和胃癌轉移者組織中，RORγt與T-bet的mRNA表達水平均增高，有統計學意義，其中 RORγt增加更加明顯，且在轉移組與原發(fā)組之間具有統計學差異(p<0.05)；
　　3）與健康對照組比較，胃癌患者血漿 IL-17表達增高，差異具有統計學意義，但轉移組與原發(fā)組之間無統計學意義。
　　4）

5、腫瘤患者體內TGF-β與IL-21mRNA與蛋白水平明顯增加，差異具有統計學意義(p<0.05)。
　　5）IL-1β mRNA和蛋白水平呈高表達，與健康對照組之間有統計學意義(p<0.05)，在胃癌轉移組和未轉移組之間也具有顯著差異(p<0.05)。
　　結論：
　　1）相對健康對照來說，胃癌和胃癌轉移患者PBMC與組織中Th17細胞及其相關的因子呈現高水平表達，Th17與胃癌的轉移具有一定的相關性；
　　2）