棉鈴蟲蛹發(fā)育與精氨酸激酶、轉(zhuǎn)錄因子AP-4的關(guān)系初探.pdf

1、棉鈴蟲(Helicoverpa armigera)為蛹滯育昆蟲，幼蟲期經(jīng)歷長短光照可以發(fā)育成滯育和非滯育兩種類型的蛹。以滯育型作為對照，用抑制差減雜交(suppressionsubtractive hybridization，SSH)方法，鑒定在正常發(fā)育(非滯育型)棉鈴蟲蛹腦內(nèi)特異表達(dá)的基因，試圖回答昆蟲個體的正常發(fā)育(相對于滯育)是如何受到基因調(diào)節(jié)的。
　　 從SSH庫中，隨機(jī)挑選5個基因進(jìn)行非滯育型和滯育型表達(dá)差異鑒定，以表

2、達(dá)差異最大的基因精氨酸激酶(arginine kinase，ArgK)作為目標(biāo)基因進(jìn)行了初步的研究。在腦中，非滯育型ArgK的蛋白活性要顯著高于滯育型。給深度滯育蛹注射蛻皮激素后能有效解除滯育，在解除過程中，血淋巴中ArgK蛋白活性上調(diào)。在蛹發(fā)育早期，血淋巴中ArgK的蛋白活性也有類似趨勢，非滯育型隨著發(fā)育的過程ArgK蛋白活性上調(diào)，而滯育型活性水平則處于相對低的狀態(tài)。原核表達(dá)了有活性的重組ArgK，深度滯育蛹在注射ArgK后能重新啟動

3、發(fā)育，這些結(jié)果表明ArgK對于棉鈴蟲的蛹期發(fā)育可能具有較重要的作用。
　　 激活蛋白4(activated protein4，AP-4)是一種能和DNA序列上得順式作用元件E-box相結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子。本實驗室根據(jù)滯育激素啟動子上的E-box元件，從棉鈴蟲腦的cDNA文庫克隆了與之可能結(jié)合的備選轉(zhuǎn)錄因子AP-4。通過調(diào)查AP-4在蛹期的發(fā)育表達(dá)，發(fā)現(xiàn)非滯育型AP-4的表達(dá)在核酸和蛋白水平都要高于滯育型，與滯育激素基因表達(dá)趨勢十分類