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文檔簡介
1、目的:本課題通過建立動物模型,檢測對比正常健康豚鼠、HSV-2感染模型豚鼠和HSV-2感染模型治療組各細胞因子的血清含量測定、蛋白測定及基因表達情況,分析細胞因子在生殖器皰疹發(fā)病過程中的作用。并進行了病毒滴度的分析、組織病理及外陰皮膚上皮細胞和神經節(jié)超微結構的觀察等研究,探討參芪止皰顆粒豚鼠體內對HSV-2的抑制作用機制,為中醫(yī)藥臨床實踐提供可靠的客觀依據,同時為現代醫(yī)學開發(fā)利用中醫(yī)藥提供科學實驗依據。
方法:本研究以Dunk
2、in Hartly白化雌性豚鼠為實驗對象,建立HSV-2感染豚鼠生殖道模型,隨機分為正常對照組、模型組、參芪止皰顆粒組和阿昔洛韋(ACV)組,各組給予相應藥物治療(模型組、正常對照組給予生理鹽水)。利用顯微鏡觀察對比各組豚鼠外陰皮膚癥狀,細胞培養(yǎng)測定豚鼠陰道組織內病毒滴度,HE染色制作子宮、輸卵管、卵巢組織病理切片、電鏡觀察并記錄病理結果及外陰皮膚組織上皮細胞及脊髓神經節(jié)超微結構的變化。用RT-PCR法測定各組豚鼠子宮、卵巢組織中IL-
3、2、IL-6、IFN-γ、TNF-α、NF-κB mRNA表達情況。用ELISA法檢測血清中IL-2、IL-6、IFN-γ、TNF-α因子含量,用蛋白印跡法檢測豚鼠子宮NF-κB蛋白表達。以上各組數據均進行統計學處理。
結果:治療結束時,將各組豚鼠陰道內病毒滴度,外陰皮膚癥狀評分,子宮、輸卵管、卵巢組織病理及外陰皮膚上皮細胞和脊髓神經節(jié)超微結構進行對比,參芪止皰顆粒組與阿昔洛韋組比較差異無統計學意義(P>0.05),各治療組與
4、模型組比較有統計學意義(P<0.05)。與模型組比較,參芪止皰顆粒組豚鼠子宮、卵巢組織中IL-2、IFN-γmRNA表達上調,IL-6和TNF-α、NF-κBmRNA表達下調,差異有統計學意義(P<0.05);血清中IL-2、IFN-γ含量高,IL-6和TNF-α含量低,差異有統計學意義(P<0.05);豚鼠子宮NF-kB蛋白表達下調,差異有統計學意義(P<0.05)。參芪止皰顆粒組與阿昔洛韋比較差異無統計學意義(P>0.05)。
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